內(nèi)源性一氧化氮對(duì)大鼠海馬毛細(xì)血管的作用及跑步鍛煉對(duì)其的影響.pdf

1、第一部分內(nèi)源性一氧化氮對(duì)大鼠海馬毛細(xì)血管的作用
　　目的：向大鼠側(cè)腦室內(nèi)注射一氧化氮合酶（ nitric oxide synthase, NOS）受體阻斷劑Nω硝基左旋精氨酸甲酯（Nω-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME）或一氧化氮（nitric oxide, NO）前體物質(zhì)左旋精氨酸（L-Arginine, L-Arg）后，觀察大鼠行為學(xué)改變和大鼠海馬內(nèi)毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)改變。以期探討內(nèi)源性NO

2、對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)、記憶能力和海馬毛細(xì)血管的影響。
　　方法：選取30只，8周齡的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組（Sham組）、阻斷劑組（L-NAME組）和激動(dòng)劑組（L-Arg組），每組各10只。首先大鼠被固定在大鼠腦立體定位儀上，根據(jù) Paxinos-Watson圖譜對(duì)大鼠側(cè)腦室定位，將內(nèi)置導(dǎo)管埋植于各組大鼠的側(cè)腦室內(nèi)，之后L-NAME組大鼠每日給予5μL的L-NAME（1μmol/μL）側(cè)腦室注射， L-Arg組大鼠每日給予5μL的

3、L-Arg（0.lμmol/μL）側(cè)腦室注射，Sham組大鼠側(cè)腦室注射同等規(guī)格的生理鹽水，持續(xù)28天。然后我們運(yùn)用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力，運(yùn)用NOS活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)海馬組織中 NOS活性，運(yùn)用總 NO含量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)NO含量，運(yùn)用體視學(xué)方法分別精確定量研究海馬、海馬CA1區(qū)和齒狀回（DG）的總體積，同時(shí)分別定量研究海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總表面積和總體積。
　　結(jié)果：1、Morris水

4、迷宮測(cè)試實(shí)驗(yàn)顯示：在第1天可視站臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，各組之間大鼠尋找可視站臺(tái)的逃避潛伏期無顯著性差異(p＞0.05)；在第2-6天定位航行試驗(yàn)中，L-NAME組大鼠的逃避潛伏期較Sham組大鼠顯著性增長(zhǎng)(p＜0.05)，而L-Arg組大鼠的逃避潛伏期與Sham組大鼠之間沒有顯著性差異(p＞0.05)；在第7天空間探索試驗(yàn)中，L-NAME組大鼠的穿臺(tái)次數(shù)較Sham組大鼠顯著性減少（p＜0.05）；L-Arg組大鼠的穿臺(tái)次數(shù)較Sham組大鼠顯著性增加

5、（p＜0.05）。2、L-NAME組大鼠海馬組織 NO含量和 NOS活性均顯著性低于 Sham組大鼠（p＜0.05），L-Arg組大鼠海馬組織NO含量和NOS活性均顯著性高于Sham組大鼠（p＜0.05）。3、L-NAME組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積與Sham組大鼠相比均顯著性減少（p＜0.05），L-Arg組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積與Sham組均無顯著性差異（p＞0.05）； L-NAME

6、組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積較L-Arg組顯著性減少（p＜0.01）。4、L-NAME組大鼠DG區(qū)毛細(xì)血管總體積較Sham組大鼠顯著性減少（p＜0.01）， L-Arg組大鼠DG區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積與Sham組大鼠之間無顯著性差異(p＞0.05)，L-Arg組大鼠DG區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積較 L-NAME組均顯著性增加(p＜0.01)。
　　結(jié)論： SD大鼠海馬內(nèi)NO生成被阻斷后，將

7、導(dǎo)致大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力下降，并且海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積以及DG區(qū)內(nèi)毛細(xì)血管總體積都相應(yīng)減少。
　　第二部分跑步鍛煉過程中一氧化氮對(duì)大鼠海馬毛細(xì)血管的作用
　　目的：研究跑步鍛煉過程中內(nèi)源性 NO對(duì)大鼠海馬毛細(xì)血管的作用，探討跑步鍛煉對(duì)大鼠海馬毛細(xì)血管作用的機(jī)制。
　　方法：選取40只，8周齡的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組（Sham組）、阻斷劑組（L-NAME組）、阻斷跑步組（L-NAME+RE

8、組）和跑步組（RE組），每組各10只。首先根據(jù)Paxinos-Watson圖譜，在大鼠腦立體定位儀上，將內(nèi)置導(dǎo)管埋植于各組大鼠的側(cè)腦室內(nèi)，L-NAME組大鼠和L-NAME+RE組大鼠每日給予5μL的L-NAME（1μmol/μL）側(cè)腦室注射，RE組大鼠和Sham組大鼠每日側(cè)腦室注射同等劑量的生理鹽水，持續(xù)28天，當(dāng)日上午給藥后，下午 L-NAME+RE組大鼠和RE組大鼠一起進(jìn)行跑步鍛煉。跑步鍛煉的參數(shù)為：以每分鐘20 m的速度，每天鍛煉

9、20 min，持續(xù)四周。然后我們運(yùn)用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力，運(yùn)用NOS活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)海馬組織中NOS活性，運(yùn)用總NO含量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)NO含量，運(yùn)用體視學(xué)方法分別精確定量研究海馬、海馬CA1區(qū)和齒狀回（DG）的總體積，同時(shí)分別定量研究海馬CA1區(qū)和DG區(qū)內(nèi)毛細(xì)血管的總長(zhǎng)度、總表面積和總體積。
　　結(jié)果：1、Morris水迷宮測(cè)試實(shí)驗(yàn)顯示：在第1天可視站臺(tái)實(shí)驗(yàn)中，各組之間大鼠尋找可視站臺(tái)的逃避潛伏期無顯

10、著性差異(p＞0.05)。第2-6天定位航行試驗(yàn)，L-NAME組大鼠和L-NAME+RE組大鼠逃避潛伏期較Sham組大鼠均顯著性增加（p＜0.05），而RE組大鼠逃避潛伏期與Sham組大鼠間未見顯著性差異（p＞0.05），但RE組大鼠潛伏期較L-NAME+RE組大鼠顯著增加（p＜0.05）L-NAME+RE組大鼠逃避潛伏期和L-NAME組大鼠間沒有顯著性差異（p＞0.05）；第7天空間探索試驗(yàn)，L-NAME組大鼠穿臺(tái)次數(shù)較Sham組大鼠

11、顯著性減少（p＜0.05）， L-NAME+RE組大鼠穿臺(tái)次數(shù)與 Sham組大鼠間未見顯著性改變(p＞0.05)，RE組大鼠穿臺(tái)次數(shù)較Sham組大鼠顯著性增加（p＜0.05），RE組大鼠穿臺(tái)次數(shù)較 L-NAME+RE組大鼠顯著性增加（ p＜0.05）， L-NAME+RE組大鼠穿臺(tái)次數(shù)與 L-NAME組大鼠未見顯著性改變(p＞0.05)。2、RE組大鼠海馬組織NO含量、NOS活性較Sham組大鼠顯著性升高（p＜0.05）；L-NAME+

12、RE組大鼠較L-NAME組大鼠顯著性升高（p＜0.05）；L-NAME+RE組大鼠海馬組織NO含量、NOS活性顯著性低于RE組大鼠（p＜0.05）。3、RE組大鼠CA1區(qū)體積較Sham組大鼠顯著性減少（p＜0.05），L-NAME+RE組大鼠海馬和海馬CA1區(qū)體積較L-NAME組大鼠顯著性減少（p＜0.05），其余各組之間無差異。4、RE組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度和總表面積較Sham組大鼠顯著性增加（p＜0.01），L-NAME+

13、RE組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積與 L-NAME組大鼠未見顯著性差異（p＞0.05）， L-NAME+RE組大鼠海馬CA1區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積較RE組大鼠顯著性減少（p＜0.01）。5、RE組大鼠DG區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度較Sham組大鼠顯著性增加（p＜0.01）， L-NAME+RE組大鼠DG區(qū)毛細(xì)血管總長(zhǎng)度、總表面積和總體積與L-NAME組大鼠未見顯著性差異（p＞0.05），L-NAME+RE組大鼠DG