XAF-1與TNF-α共表達腺病毒抑制肝癌細胞生長的作用研究.pdf

1、目的：本研究探討共表達XAF-1和TFN-α對HCC細胞生長的作用，并分析其分子機制。
　　方法：在本研究中，檢測了肝細胞癌癌組織樣本中XAF-1的mRNA和蛋白水平，并在肝癌細胞系中證實了共表達XAF-1和TFN-α的腺病毒對肝癌細胞的顯著的抑制作用。建立HepG2 M人肝細胞癌97H細胞裸鼠移植瘤模型，并運用重組共表達XAF-1和TNF-α腺病毒及Ad-con對裸鼠移植瘤模型進行瘤內注射，對照組每次注射同等體積的生理鹽水作為對

2、照。觀察裸鼠移植瘤的生長情況，并通過比較腫瘤體積的變化和對腫瘤的抑制率來評價其體內治療的效果。
　　結果：肝細胞癌癌組織樣本中 XAF-1的表達量明顯低于肝細胞癌瘤旁樣本，說明其降低與腫瘤惡性程度相關。同時也在肝細胞癌細胞系，如MHCC97L, HepG2和 MHCC97H中證實了XAF-1表達量的降低。本研究用一段2A肽編碼序列，構建重組的腺病毒Ad-XAF-1&TNF-α，有效的共表達了XAF-1和TFN-α。當Ad-XAF-

3、1和TNF-α轉染MHCC97L細胞后，XAF-1和TFN-α的mRNA和蛋白水平明顯升高。此外，確認了被Ad-XAF-1&TNF-α轉染的MHCC97L細胞，細胞增值率明顯低于單獨用Ad-XAF-1或 Ad-TNF-α病毒感染的細胞。
　　與PBS對照組注射的裸小鼠瘤體積相比較，，Ad-XAF-1&TNF-α組及Ad-con組裸小鼠的瘤體積增長，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；Ad-XAF-1&TNF-α治療組裸小鼠瘤體積增長

4、最為緩慢，與Ad-con組裸小鼠的瘤體積相比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Ad-XAF-1&TNF-α注射后的第7天，抑瘤率最高，達到65.87％，隨后抑瘤率呈下降趨勢。在注射后第28天，抑瘤率為60.78%.免疫組化染色以及RT-PCR實驗結果表明，與Ad-con組及PBS組裸鼠瘤組織XAF-1、TNF-α的陽性表達率相比（6.11%±1.73，6.42%±2.59），Ad-XAF-1&TNF-α治療組裸鼠瘤組織XAF-1、T

5、NF-α的陽性率表達增高（16.39%±1.39），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Ad-XAF-1&TNF-α治療組裸鼠瘤組織中 XAF-1、TNF-α基因的 mRNA表達水平均較Ad-con組、PBS組裸鼠瘤組織中XAF-1、TNF-α基因的mRNA表達水平增高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　結論：Ad-XAF-1&TNF-α共表達病毒可以較單表達XAF-1、TNF-α的腺病毒更有效的抑制肝細胞癌細胞增殖，介導XA