白藜蘆醇延緩小鼠卵母細(xì)胞體外老化的研究.pdf

1、目的：探討白藜蘆醇對小鼠卵母細(xì)胞體外老化的影響。
　　方法：使用PMSG和HCG對小鼠促排后收集體內(nèi)成熟的MII期卵母細(xì)胞，隨機分入新鮮對照組及老化組或不同濃度白藜蘆醇處理組。采用免疫熒光技術(shù)檢測體外老化前后卵母細(xì)胞紡錘體、染色體形態(tài)、微絲帽表達(dá)及線粒體分布情況、測定ROS水平并進(jìn)行比較；添加不同濃度白藜蘆醇在體外老化過程中處理卵母細(xì)胞，比較白藜蘆醇處理后ROS水平的改變，并分析其對卵母細(xì)胞紡錘體、染色體、微絲帽及線粒體的影響。<

2、br>　　結(jié)果：
　　（1）老化組的卵母細(xì)胞紡錘體異常形態(tài)率（61.34％ vs19.80%，P<0.05）及染色體異常形態(tài)率（58.76% vs27.41%，P<0.05）均顯著高于未老化的新鮮對照組，微絲帽表達(dá)率則明顯低于新鮮對照組（26.58% vs87.88%，P<0.05）；線粒體在新鮮對照組中以均勻型分布為主（68.84%）,其余為團(tuán)簇樣分布（16.74%）及極性分布（14.42%），老化組線粒體團(tuán)簇樣分布比例升高至6

3、8.16%，均勻分布及極性分布比例則分別降至27.86%及3.98%，兩組分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　?。?）老化組ROS水平顯著高于新鮮對照組（P<0.05），分別使用2μM、5μM、10μM、25μM白藜蘆醇處理后卵母細(xì)胞的ROS水平均顯著低于老化組（P<0.05）。（3）在2μM、5μM、10μM、25μM處理組中紡錘體異常率分別為21.21%、37.06%、40.31%、40.00%，全部低于同樣條件未添加白

4、藜蘆醇的老化組（61.34%，P<0.05）；染色體異常率為34.85%、37.56%、43.37%、46.49%，同樣低于老化組（58.76%， P<0.05），而微絲帽表達(dá)率分別為80.25%、76.36%、77.38%、50.00%，均顯著高于老化組（26.58%，P<0.05）；2μM、5μM、10μM、25μM處理組卵母細(xì)胞線粒體團(tuán)簇樣分布比例分別為44.84%、46.33%、52.15%、52.07%，均低于老化組（68.1

5、6%），均勻分布的比例（51.57%、50.00%、43.06%、43.32%）則高于老化組（27.86%），而線粒體呈極性分布的卵母細(xì)胞比例與老化組相似，各組線粒體分布模式與老化組均有顯著差異（P<0.05）。
　　結(jié)論:（1）體外老化后卵母細(xì)胞發(fā)生了損傷性改變；（2）體外老化后卵母細(xì)胞ROS水平升高，提示氧化應(yīng)激與卵子老化性改變相關(guān)；（3）白藜蘆醇能夠減緩老化卵母細(xì)胞ROS水平的上升；（4）白藜蘆醇處理能夠緩解卵母細(xì)胞老化時的