NF-κB信號通路介導(dǎo)抵抗素在川崎病冠狀動(dòng)脈損傷的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：川崎病(KD)因其所致冠狀動(dòng)脈損傷(CALs)已成為發(fā)達(dá)國家兒童后天性心臟病的主要病因。目前對KD患兒CALs機(jī)制及防治研究已成為兒科心血管醫(yī)生關(guān)注的焦點(diǎn)。成人心血管疾病研究發(fā)現(xiàn)，抵抗素(Resistin)可預(yù)測動(dòng)脈粥樣硬化及炎癥疾病中血管再閉塞的進(jìn)展。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，抵抗素在川崎病伴有冠狀動(dòng)脈瘤的患兒血清中表達(dá)水平較高。
　　目的：探討抵抗素在川崎病小鼠模型冠狀動(dòng)脈損傷中的作用及機(jī)制。
　　方法：⑴收集川崎病患兒

2、和正常對照組血清，采用ELISA測量川崎病急性期患兒的血清中細(xì)胞因子表達(dá)水平；⑵干酪乳桿菌細(xì)胞壁提取物(LCWE)單次腹腔注射誘導(dǎo)小鼠川崎病冠狀動(dòng)脈病變模型，免疫組織化學(xué)測量冠狀動(dòng)脈血管壁抵抗素表達(dá), ELISA法和Real-time PCR檢測小鼠心臟Resistin、MMP-9、TNF-α和IL-1β的表達(dá)水平；⑶使用人重組抵抗素、TLR4抗體、NF-κB信號通路抑制劑（小白菊內(nèi)酯、QNZ）刺激人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAECs)，R

3、eal-time PCR檢測 TNF-α和IL-1β的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：①川崎病伴有冠狀動(dòng)脈損傷的患兒血清中中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α和 IL-1β表達(dá)水平顯著高于川崎病無冠狀動(dòng)脈損傷的患兒及健康對照組（P<0.05）。②在川崎病模型小鼠冠狀動(dòng)脈血管壁上抵抗素表達(dá)水平上調(diào)。同時(shí)，冠狀動(dòng)脈周圍炎癥細(xì)胞浸潤增多。③與野生型小鼠相比，RETN(-/-)小鼠細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β與MMP-9表達(dá)水平均較低。④抵抗素誘導(dǎo)人冠狀動(dòng)

4、脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的TNF-α被小白菊內(nèi)酯、QNZ有效抑制。抵抗素誘導(dǎo)人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1β只被小白菊內(nèi)酯有效抑制。與對照組相比，予TLR4抗體孵育組IL-1β表達(dá)水平明顯下降（P<0.001）,而 TNF-α表達(dá)水平未見明顯下降。
　　結(jié)論：⑴川崎病患兒血清中上調(diào)的TNF-α和IL-1β可能促進(jìn)中性粒細(xì)胞浸潤，以及中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞相互作用從而激活血管內(nèi)皮細(xì)胞，參與川崎病致冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮損傷過程。⑵抵抗素可能通過促進(jìn)炎癥