滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型炎性細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：
　　動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是一種主要累及大、中動(dòng)脈的疾病，其基本病變是動(dòng)脈內(nèi)膜的脂質(zhì)沉積、內(nèi)膜纖維樣、粥樣斑塊形成引起管壁變硬、管腔狹窄，繼而引起一系列繼發(fā)病變，AS是多種心腦血管疾病的病變基礎(chǔ)。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在AS中檢測(cè)到炎癥細(xì)胞和炎癥介質(zhì)，不論在AS的啟動(dòng)、病變之進(jìn)展、還是在血栓性并發(fā)癥形成中，炎癥始終為其關(guān)鍵因素。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為AS與痰關(guān)系密切，痰是人體臟腑氣血失和，津液運(yùn)化失常的病理產(chǎn)物，是一種危害甚廣的致病因素。因此

2、，探索動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展機(jī)制成為防治心腦血管病的重中之重。在本研究中，通過對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化新西蘭兔模型灌胃滌痰湯水煎液，檢測(cè)AS兔主動(dòng)脈粥樣斑塊的病理組織改變，從細(xì)胞以及分子生物水平,研究滌痰湯水煎液對(duì)AS兔炎性因子的影響。
　　方法：
　　48只雄性新西蘭白兔按隨機(jī)數(shù)字表法，分為6組，每組8只，即空白組、AS模型組、滌痰湯低、中、高劑量組和阿托伐他汀鈣組。空白組飼以普通飼料；其余各組飼以高脂飼料。8周后，隨機(jī)選取AS模型

3、組兔2只，麻醉后，取頸總動(dòng)脈血，查血脂，提示血脂明顯增高；主動(dòng)脈分離后制備HE片，血管壁內(nèi)均可見明顯的粥樣斑塊，提示AS造模成功。AS模型組以生理鹽水10ml/kg灌胃4周，期間繼續(xù)喂以高脂飼料；滌痰湯高劑量組給予高濃度中藥煎劑(0.738g/ml)灌胃、滌痰湯中劑量組給予中等濃度中藥煎劑(0.492g/ml)灌胃、滌痰湯低劑量組給予低濃度中藥煎劑(0.266g/ml)灌胃以及阿托伐他汀鈣組應(yīng)用阿托伐他汀鈣3mg2kg-1d-1灌胃，各

4、組均按10ml/kg灌胃，每日14:00按時(shí)灌胃1次，持續(xù)4周，期間繼續(xù)喂以高脂飼料。于末次給藥后禁食(不禁水)12 h，次晨經(jīng)頸總動(dòng)脈取血4 mL，應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中Tc、TG、LDL-c、HDL-c、SOD和MDA的含量；ELISA法測(cè)定血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的含量；靜脈注射戊巴比妥鈉(25 mg／kg)后，新西蘭白兔很快進(jìn)入麻醉期,然后迅速分離心臟到髂總動(dòng)脈分叉處之間的主動(dòng)脈，剔除干凈動(dòng)

5、脈周圍的脂肪組織，并于主動(dòng)脈弓處取直徑3 mm的組織作HE染色及用Western blot方法作主動(dòng)脈NF-κB、E-selectin蛋白表達(dá)檢測(cè)，用熒光定量PCR檢測(cè)TNF-α和IL-6mRNA表達(dá)及用免疫組化法檢測(cè)ICAM-1、VCAM-1表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型血清 Tc、TG、HDL-c、LDL-c的影響：滌痰湯能降低AS兔血清 Tc、TG、LDL-c水平，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差

6、異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　2滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型血清SOD、MDA的影響：滌痰湯能提高AS兔SOD水平，降低MDA水平，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　3滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型血清TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的影響：滌痰湯能降低AS兔主動(dòng)脈血清TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的表達(dá)，且呈劑量依賴性，與模型組

7、比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　4滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型主動(dòng)脈NF-κB、E-selectin蛋白表達(dá)的影響：滌痰湯能降低AS兔主動(dòng)脈NF-κB和E-selectin蛋白的表達(dá)，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　5滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型主動(dòng)脈TNF-α、IL-6 mRNA表達(dá)的影響：滌痰湯能降低AS兔主動(dòng)脈TNF-α、IL-6 mRNA的表達(dá)，

8、且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　6滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型主動(dòng)脈ICAM-1、VCAM-1的影響：滌痰湯能降低AS兔主動(dòng)脈ICAM-1、VCAM-1的表達(dá)，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　7滌痰湯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型動(dòng)脈血管組織病理學(xué)改變的影響：空白組可見主動(dòng)脈壁厚薄均勻，內(nèi)膜光滑完整，無AS斑塊形成；AS模型組，內(nèi)膜層隆起

9、，內(nèi)膜下可見大量泡沫細(xì)胞聚集和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積；滌痰湯低劑量組，內(nèi)膜下泡沫細(xì)胞聚集和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積開始有所減少；滌痰湯中劑量組，內(nèi)膜下泡沫細(xì)胞聚集和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積減少比較明顯；滌痰湯高劑量組，內(nèi)膜下泡沫細(xì)胞聚集和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積明顯減少；阿托伐他汀鈣組，內(nèi)膜下泡沫細(xì)胞聚集和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積明顯減少。
　　結(jié)論：
　　1.在本實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用高脂飼料成功造模了動(dòng)脈粥樣硬化模型，中醫(yī)的理論認(rèn)為，“痰”與高脂血癥密切相關(guān)。由此推論，動(dòng)脈粥樣