TRPV4通道在正常及高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷中的作用及其可能機制研究.pdf

1、目的：探討TRPV4通道是否參與正常及高血壓大鼠的心肌缺血再灌注損傷，并對其可能機制進行初步研究。
　　方法：(1)選取健康Sprague-Dawley(SD)大鼠并運用“兩腎一夾”方法制備高血壓大鼠模型。健康(normal, n)SD大鼠/高血壓(hypertensive, h)大鼠均分別隨機分為缺血/再灌注(nI/R/hI/R)組、TRPV4抑制劑(nRN1734/hRN1734)組和 TRPV4激動劑(nRN1734/hRN

2、1747)組(每組n=6)。(2)采用langendorff離體心臟灌流裝置對上述各組大鼠離體心臟進行灌流。nI/R/hI/R組在平衡灌流20 min后，全心缺血30 min，復灌120min；nRN1734/hRN1734組在復灌前5 min給予特異性TRPV4抑制劑RN1734(10μM)，其余處理同 nI/R/hI/R組；nRN1734/hRN1747組在復灌前5 min給予特異性TRPV4激動劑RN1747(10μM)，其余處理

3、同nI/R/hI/R組。Powerlab生物信號處理系統(tǒng)記錄各組血流動力學指標，收集并測量各組冠脈流出液(coronary flow，CF)每分鐘流量，并檢測灌流液中乳酸脫氫酶(LDH)的含量，用TTC染色法分析心臟梗死面積；免疫組化及western blotting法檢測TRPV4蛋白在各組大鼠心肌組織中的表達差異。檢測TRPV4開放時心肌細胞內ROS及Ca2+含量的變化
　　結果：(1)成功制備了“兩腎一夾”高血壓大鼠模型。造

4、模術后7天、14天，大鼠與造模前相比血壓明顯升高，且差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.001)。(2)與單純缺血/再灌注相比，TRPV4通道開放使正常大鼠及高血壓大鼠缺血后再灌注期左室發(fā)展壓(LVDP)、左室舒張末壓(LVEDP)、左室壓最大上升/下降速率(±dp/dtmax)、心率(HR)及冠脈流量(CF)的恢復明顯增強(P<0.05)，而心肌梗死面積和乳酸脫氫酶含量明顯減小(P<0.01)。(3)免疫組化及Western blotti

5、ng結果顯示高血壓大鼠心肌上TRPV4蛋白的表達高于正常大鼠(P<0.05)；與單純缺血再灌注比，TRPV4激動劑RN1747可使正常和高血壓大鼠心肌TRPV4表達增強(P<0.05)，而TRPV4抑制劑RN1734可使TRPV4表達減少(P<0.05)。(4)與對照組相比，TRPV4通道的開放引起心肌細胞內Ca2+濃度增加、ROS生成減少(P<0.05)。
　　結論：TRPV4通道開放對正常及高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作