慢性間歇性缺氧對(duì)大鼠心肌的影響及脂聯(lián)素的干預(yù)機(jī)制.pdf

1、目的：
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(obstructive sleep apnea syndrome; OSAS)是臨床上常見(jiàn)的一種疾病，與高血壓、心衰、動(dòng)脈粥樣硬化等許多心血管疾病有密切的關(guān)系。慢性間歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia; CIH)是OSAS主要的病理生理學(xué)特征。本研究主要目的在于(1)CIH是否對(duì)大鼠心功能造成損傷及其損傷機(jī)制。(2)探索內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所致的心肌細(xì)胞凋亡及心肌纖維化在

2、CIH致大鼠心功能損傷中的機(jī)制。(3)探索脂聯(lián)素(adiponectin，Ad)對(duì)心臟的保護(hù)作用及其可能的調(diào)控機(jī)制，從而為治療OSAS研制新藥提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　將45只健康成年雄性Wistar大鼠(SPF級(jí)別，體重180-200g)隨機(jī)分成三組:正常對(duì)照組（normal control; NC）、慢性間歇性缺氧組(CIH)和慢性間歇性缺氧+脂聯(lián)素組(CIH+Ad)，每組15只。其中CIH和CIH+Ad組接受慢性

3、間歇性缺氧處理，每天8小時(shí)，共5周。而CIH+Ad組每周接受2次脂聯(lián)素尾靜脈注射，每次注射量10ug。造模完成后，使用ELISA法檢測(cè)大鼠血清脂聯(lián)素水平、超聲心動(dòng)圖檢測(cè)大鼠心功能、Terminal deoxynucleotidyl transfer-mediated dUTPnick end-labeling(TUNEL)法檢測(cè)大鼠心肌細(xì)胞凋亡、Masson染色檢測(cè)心肌纖維化、DHE染色檢測(cè)大鼠心肌ROS水平、western blot法

4、檢測(cè)大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白及PCR法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激基因表達(dá)。以p＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　造模結(jié)束后，研究發(fā)現(xiàn)CIH組大鼠脂聯(lián)素濃度(1442±133.3ng/ml)明顯低于NC組(1872±286.1 ng/ml)，而CIH+Ad組脂聯(lián)素濃度(1757±251.6 ng/ml)則明顯高于CIH組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而CIH+Ad組脂聯(lián)素濃度與NC組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。超聲心

5、動(dòng)圖顯示與NC組相比，CIH組大鼠心功能明顯下降。與CIH組相比，CIH+Ad組大鼠心功能有明顯改善，但仍低于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TUNEL染色顯示CIH組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率明顯高于NC組和CIH+Ad組，而CIH+Ad組心肌細(xì)胞凋亡率仍顯著高于NC組，以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Masson染色顯示CIH組心肌纖維化面積明顯大于NC組，CIH+Ad心肌纖維化面積明顯低于CIH組但高于NC

6、組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DHE染色顯示與NC和CIH+Ad組相比，CIH組大鼠心肌組織ROS.水平明顯增高，而CIH+Ad組大鼠心肌組織ROS水平明顯高于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Western Blot法顯示CIH組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白及心肌纖維化相關(guān)蛋白表達(dá)水平明顯高于NC組和CIH+Ad組，而CIH+Ad組相關(guān)蛋白表達(dá)水平明顯高于NC組。以上結(jié)果p＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。P

7、CR顯示與NC組相比，CIH組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及心肌纖維化相關(guān)基因表達(dá)明顯升高。而CIH+Ad組相關(guān)基因較CIH組相比表達(dá)下降，較NC組相比表達(dá)仍增高。
　　結(jié)論：
　　本研究主要發(fā)現(xiàn):(1) CIH可以引起大鼠血清脂聯(lián)素水平下降，同時(shí)引起大鼠心功能障礙。(2)大鼠心肌細(xì)胞凋亡及大鼠心肌纖維化是引起大鼠心功能障礙的重要機(jī)制。(3) CIH引起大鼠心肌組織ROS產(chǎn)生增加從而引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，進(jìn)而誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡。(4)補(bǔ)充脂聯(lián)素后，脂