版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、青藤堿(sinomenino,SIN)是一種來源于防己科植物毛青藤(Sinomenium actum Rehd.et wils.Var cinerrum Rehd.et wils)及青藤(Sinomenium actum Rehd.et wils.)干燥藤莖的生物堿類成分,其結(jié)構(gòu)與嗎啡相似。臨床上用其鹽酸鹽或者磷酸鹽的制劑治療風(fēng)濕性疾病及心率失常等。但是,長期使用發(fā)現(xiàn)其存在用量大、起效慢、半衰期短等缺陷。本課題組對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,合成了
2、一系列青藤堿4-羥基酯化物,前期的工作中發(fā)現(xiàn)青藤堿4-羥基棕櫚酸酯(C16)有很好的抗炎效果。
內(nèi)毒素血癥是全身性的多器官衰竭的惡性炎癥反應(yīng),死亡率極高。在臨床上尤其是創(chuàng)傷外科,一直是難以克服的一大難題。巨噬細(xì)胞是一種重要的免疫細(xì)胞,在不同的微環(huán)境中或者細(xì)胞因子的刺激下,可以極化為M1或M2型。巨噬細(xì)胞根據(jù)其功能亞型的不同,參與不同信號通路的調(diào)節(jié)。
所以,本研究在LPS誘導(dǎo)的小鼠內(nèi)毒素血癥模型上,對C16進(jìn)行抗炎活性
3、評價;探究C16基于調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化相關(guān)的抗炎機(jī)制,具體工作如下:
(1) C16的制備及毒副作用評價
根據(jù)前藥設(shè)計與拼合原理,以DMAP為催化劑,EDC為縮合劑,青藤堿4位羥基取代反應(yīng)與棕櫚酸結(jié)合,制備青藤堿4-羥基棕櫚酸酯,并對其進(jìn)行核磁共振氫譜以及質(zhì)譜的結(jié)構(gòu)鑒定??疾霤16對小鼠的肝腎毒性,檢測血清指標(biāo)ALT、AST的活性以及BUN的含量;對肝臟、腎臟做組織病理切片觀察。結(jié)果表明,與模型組相比,C16作用后,各
4、生化指標(biāo)顯著降低,小鼠肝、腎組織無明顯損傷。
(2)C16對LPS所致內(nèi)毒素血癥小鼠的治療作用
將10 mg/mL LPS注射于小鼠腹腔,建立內(nèi)毒素血癥模型。在此模型上,考察C16高、低劑量作用下的抗炎作用,并與其先導(dǎo)化合物SIN作對照。發(fā)現(xiàn)C16與SIN作用后,感染內(nèi)毒素血癥的小鼠存活率顯著提高;與模型組相比,外周血清中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表達(dá)顯著降低;心、脾、肺和腎臟組織中炎癥因子IL-1β
5、和IL-6 mRNA表達(dá)也相應(yīng)的降低。C16高劑量組抗炎作用效果強(qiáng)于低劑量組,且與SIN相比,作用效果更明顯。
(3)C16對巨噬細(xì)胞的調(diào)控作用
在體外巨噬細(xì)胞模型上,采用MTT法檢測C16對巨噬細(xì)胞增殖的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)分析C16對巨噬細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果顯示,C16在5?M以下對細(xì)胞增殖沒有明顯的抑制作用,對細(xì)胞凋亡也無顯著影響。該部分工作為下步實(shí)驗(yàn)優(yōu)選了合適的作用濃度。之后,采用500 ng/mL LPS誘
6、導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型極化;20 ng/mL IL-4誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化。在傳代巨噬細(xì)胞ANA-1以及原代腹腔巨噬細(xì)胞模型上,采用多種方法檢測了巨噬細(xì)胞 M1型和 M2型相關(guān)因子的表達(dá)。qRT-PCR技術(shù)檢測了細(xì)胞中iNOS、Arg-1、CD206、Ym1以及Fizz1 mRNA的表達(dá);試劑盒檢測了iNOS和Arg-1的酶活性;Western Blot分析了細(xì)胞中iNOS和Arg-1在蛋白水平的改變;ELISA試劑盒檢測細(xì)胞上清液中炎
7、癥因子IL-1β與TNF-α的含量。多種方法綜合分析發(fā)現(xiàn),C16作用后,與模型組相比,M1型相關(guān)因子在不同水平的表達(dá)都顯著下降,M2型相關(guān)因子在不同水平的表達(dá)都顯著上升。結(jié)果表明,C16能很好的抑制巨噬細(xì)胞向M1型極化,促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2型極化。
(4)C16調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化的分子機(jī)制
該部分采用Western Blot技術(shù),檢測了MAPK、JAK/STAT、PI3K/AKT通路的相關(guān)信號的表達(dá)。分別檢測了p38、S
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 青藤堿-4-羥基-棕櫚酸酯抗炎作用的研究.pdf
- EGCG棕櫚酸酯抗PRRSV活性研究.pdf
- 青藤堿對巨噬細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)效應(yīng)及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf
- 青藤堿的結(jié)構(gòu)修飾及其抗炎活性研究.pdf
- 7-乙基-10-羥基喜樹堿棕櫚酸酯長循環(huán)脂質(zhì)體的研究.pdf
- 大黃酸在LPS活化巨噬細(xì)胞中發(fā)揮抗炎與促炎雙向作用的機(jī)制研究.pdf
- 青藤堿對小鼠巨噬細(xì)胞TLR4-NF-κB信號通路作用的研究.pdf
- 鹽酸小檗堿對脂多糖所致巨噬細(xì)胞炎癥的抗炎作用及其機(jī)制研究.pdf
- 鹽酸青藤堿誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬的機(jī)制及在抗炎中的作用.pdf
- NaCl對M1型巨噬細(xì)胞極化的調(diào)控及其機(jī)制研究.pdf
- 丹參酚酸A對AngⅡ誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生抗氧化、抗凋亡和抗炎的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 4-羥基-3-甲氧基肉桂酸乙酯的除草活性及作用機(jī)制研究.pdf
- 青藤堿抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜相關(guān)細(xì)胞因子的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- Notch信號通路調(diào)控巨噬細(xì)胞極化在腫瘤進(jìn)展中作用機(jī)制研究.pdf
- 鹽酸青藤堿酶法羥基化的初步研究.pdf
- 4-羥基苯基維甲酰胺抗肝癌作用及其機(jī)制研究.pdf
- 調(diào)控巨噬細(xì)胞極化抗小鼠日本血吸蟲病肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- Vc棕櫚酸酯制備工藝的研究.pdf
- 二甲雙胍對棕櫚酸誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥因子的影響及機(jī)制研究.pdf
- 巨噬細(xì)胞極化在白塞病發(fā)病機(jī)制中作用的研究.pdf
評論
0/150
提交評論