網(wǎng)膜素對非酒精性脂肪肝細(xì)胞核因子κB、腫瘤壞死因子-α和胰島素受體底物2的影響.pdf

1、目的:
　　探討網(wǎng)膜素對非酒精性脂肪肝細(xì)胞的核因子-κB(NF-κB)、腫瘤壞死因子(TNF-α)以及胰島素底物受體-2(IRS-2)表達的影響。
　　方法:
　　選用軟脂酸誘導(dǎo)Chang Liver細(xì)胞脂肪變性模擬非酒精性脂肪肝病(NAFLD)體外模型。將實驗細(xì)胞分為C組（正常對照組），P組(模型組，加入軟脂酸500μmol/L)及在P組基礎(chǔ)上分別加入重組人網(wǎng)膜素0.02μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL

2、的O1組、O2組和O3組。各組給予相應(yīng)處理72h后，觀察細(xì)胞的脂肪變性并采用半定量realtime-PCR及Western blot法檢測細(xì)胞NF-κB、TNF-α、IRS-2的基因及蛋白表達水平，采用免疫沉淀及增強化學(xué)發(fā)光法檢測IRS-2磷酸化程度。將數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　在油紅O染色的細(xì)胞爬片中可以看到隨著網(wǎng)膜素濃度的增加，O1組、O2組和O3組細(xì)胞中橘紅色脂滴逐漸減少，

3、染色程度逐漸減少。分別與P組比較，O1組、O2組和O3組的NF-κB mRNA水平分別下調(diào)至0.52、0.21、0.12倍，且P值均＜0.05，O1組、O2組和O3組的TNF-α mRNA水平分別下調(diào)至0.68、0.34、0.16倍，且P值均＜0.05，O1組、O2組和O3組的IRS-2 mRNA水平分別上調(diào)至1.45、2.38、4.51倍，且P值均＜0.05。O1組、O2組和O3組之間NF-κB和TNF-αmRNA含量隨著網(wǎng)膜素濃度增