II型限制性內(nèi)切酶pstI在合成生物學(xué)中的應(yīng)用.pdf

1、II型限制性內(nèi)切酶型限制性內(nèi)切酶pstI在合成生物學(xué)中的應(yīng)用在合成生物學(xué)中的應(yīng)用TheapplicationoftypeIIrestrictionendonucleasePstItosyntheticbiology研究生姓名舒?zhèn)チ紝W(xué)號(hào)10808069專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)導(dǎo)師姓名陳國強(qiáng)職稱教授入學(xué)日期2008年9月論文答辯日期2011年6月3日汕頭大學(xué)碩士學(xué)位論文I摘要本論文是以研究PstI限制性內(nèi)切酶對(duì)宿主基因組的影響為目的。把帶有

2、PstI基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入到RosettaTM菌中，在30oC條件下加入終濃度為1mMIPTG誘導(dǎo)表達(dá)PstI內(nèi)切酶，通過體外酶切實(shí)驗(yàn)證實(shí)，產(chǎn)生的PstI蛋白具有正常的II型限制性內(nèi)切酶功能。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生的PstI內(nèi)切酶可以將宿主基因組切開，被切開的基因組隨后會(huì)被DNA酶降解，最后可以得到?jīng)]有基因組的細(xì)菌空殼。在誘導(dǎo)3小時(shí)后，用DAPI進(jìn)行染色，在激光共聚焦顯微鏡下觀察的結(jié)果說明RosettaTM菌的基因組被完全降解。因此使用這個(gè)方法可以