雌激素受體ER和甲狀腺激素受體TR介導(dǎo)的典型環(huán)境內(nèi)分泌干擾物效應(yīng)研究.pdf

1、內(nèi)分泌干擾物是近年來環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。目前，我國還未建立有效的內(nèi)分泌干擾物清單，也缺乏能夠快速、有效地對化合物內(nèi)分泌干擾效應(yīng)進(jìn)行高通量篩選的平臺。本研究構(gòu)建了以中國倉鼠卵巢癌細(xì)胞(CHO-K1)為宿主細(xì)胞，通過雌激素受體α(ERα)和甲狀腺激素受體β(TRβ)介導(dǎo)的雙熒光報(bào)告基因系統(tǒng)，并結(jié)合T-screen實(shí)驗(yàn)和計(jì)算毒理學(xué)技術(shù)，對3類化合物——限用殺蟲劑銳勁特及其代謝產(chǎn)物、20種典型持久性有機(jī)污染物多氯聯(lián)苯(PCBs)和9種新

2、型工業(yè)替代品有機(jī)磷阻燃劑(OPFRs)的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)進(jìn)行了定性及定量評價(jià)。主要的研究工作和成果分為以下3部分內(nèi)容:
　　(1)銳勁特及其代謝產(chǎn)物的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)評價(jià):在雙熒光報(bào)告基因體系中，銳勁特砜化物具有抗雌和抗甲活性，比其母本化合物（只有抗雌活性）表現(xiàn)出了更強(qiáng)的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。此外，通過分子對接后發(fā)現(xiàn):在與TRβ的結(jié)合方面，銳勁特代謝產(chǎn)物（砜化物）比母本化合物具有更強(qiáng)的親和力，即具有更強(qiáng)的抗甲狀腺激素活性，這一點(diǎn)也有力地支持

3、了前期細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
　　(2)20種PCBs的甲狀腺激素效應(yīng)評價(jià):在檢測的20種PCBs中，PCB44，PCB52，PCB101，PCB110和PCB180具有類甲狀腺激素活性;而PCB99，PCB118，PCB128，PCB138，PCB163，PCB180，PCB187，PCB194和PCB199則具有抗甲狀腺激素活性，其中PCB180既具有類甲活性也具有抗甲活性。此外，分子對接技術(shù)也對PCBs活性大小差異的潛在原因進(jìn)行了

4、探討和解釋。從構(gòu)效層面分析，氯原子的取代個(gè)數(shù)或取代位置可能會影響PCBs與甲狀腺受體TRβ間的相互作用。
　　(3)9種OPFRs的甲狀腺激素效應(yīng)評價(jià):通過TRβ介導(dǎo)的報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測發(fā)現(xiàn)，9種OPFRs均無激動活性，而其中4種則表現(xiàn)出顯著的抗甲狀腺激素效應(yīng)，活性大小順序如下:TCP＞TBP＞TCPP＞TDCPP。這一結(jié)果在T-screen實(shí)驗(yàn)中得到了部分驗(yàn)證。此外，分子對接結(jié)果顯示OPFRs甲狀腺激素活性的強(qiáng)弱部分程度上取決于它