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文檔簡介
1、目的:
探究DNA依賴蛋白激酶(DNA dependent protein kinase,DNA-PK)在腫瘤組織中的表達(dá)情況,以及其對(duì)膀胱癌細(xì)胞增殖能力、侵襲能力以及細(xì)胞周期的影響。
方法:
采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測膀胱癌組織以及癌旁組織DNA-PK的表達(dá)情況,通過使用DNA-PK的SiRNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染以及DNA-PK特異性抑制劑NU7026抑制膀胱癌細(xì)胞中DNA-PK的表達(dá)。通過實(shí)時(shí)定量PCR以及West
2、ern blot分別從RNA水平和蛋白水平檢測各組細(xì)胞DNA-PK表達(dá)量。MTT法及Edu法檢測對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖能力的差別。采用Transwell法檢測膀胱癌細(xì)胞遷移能力及侵襲能力。最好通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期的變化。
結(jié)果:
膀胱癌組織較癌旁組織DNA-PK表達(dá)量明顯升高,DNA-PK SiRNA能夠顯著抑制DNA-PK的表達(dá),DNA-PK SiRNA轉(zhuǎn)染的膀胱癌細(xì)胞以及NU7026預(yù)處理的膀胱癌細(xì)胞增殖能
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