DNA-PK的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞增殖的關(guān)系及對DNA損傷藥物敏感性的影響的研究.pdf

1、分類號U D f孝中科技大浮博士學(xué)位論文密級D N A —P K 的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞增殖的關(guān)系及對D N A 損傷藥物敏感性的影響的研究申請人姓名：田曉予指導(dǎo)教師：馬丁教授學(xué)科專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)研究方向：婦科腫瘤論文起止時(shí)間：2 0 0 4 年3 月至2 0 0 6 年4 月同濟(jì)醫(yī)學(xué)院研究生部二0 0 六年四月華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院 博士學(xué)位論文的陽性率低于K u 7 0 ，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P > O ．叭) 。不同組織類型的卵巢

2、癌D N A - - P K c s 和K u 7 0 的表達(dá)無差異。初發(fā)癌組織D N A ．P K c s 表達(dá)中陽性及強(qiáng)陽性( + + 一卅) 為3 6 ％( 1 3 ／3 6 ) ，復(fù)發(fā)后癌組織D N A —P K c s 表達(dá)中陽性及強(qiáng)陽性( + + 一卅) 為8 3 ％( 3 0 ／3 6 ) ，復(fù)發(fā)癌組織較初發(fā)癌組織D N A —P K c s 中陽性和強(qiáng)陽性表達(dá)明顯增加( x 2 = 1 6 ．6 8 6 ，戶 0 ．0

3、1 ) ，復(fù)發(fā)前后自身比較，復(fù)發(fā)較初發(fā)K u 7 0 表達(dá)增強(qiáng)1 4 ，無變化2 0 ，減弱2 ，配對秩和檢驗(yàn)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( Z 一2 ．0 7 8 ，P > O ．0 1 ) 。D N A 測序分析證實(shí)成功構(gòu)建了K u 7 0 s h R N A 和D N A —P K c ss h R N A 重組表達(dá)載體p S I R E N K u 7 0 s h R N A 和p S I R E N D N A —P K c ss

4、 h R N A ，并成功轉(zhuǎn)染A 2 7 8 0 細(xì)胞和H e L a 細(xì)胞，轉(zhuǎn)染重組載體的A 2 7 8 0 細(xì)胞和H e L a 細(xì)胞K u 7 0 和D N A - - P K c s 的表達(dá)在m R N A 和蛋白水平均明顯下降，其中p S I R E N K u 7 0 s h R N A l 和p S I R E N D N A - P K c s s h R N A 2 有更好的抑制效率；轉(zhuǎn)染p S I R E N 組與未

5、轉(zhuǎn)染組比較細(xì)胞生存率、各細(xì)胞周期變化及凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P > 0 ．0 1 ) ，轉(zhuǎn)染重組載體p S I R E N K u 7 0 s h R N A l 和p S I R E N D N A —P K c ss h R N A 2 細(xì)胞增殖活性較轉(zhuǎn)染p S I R E N 組均降低，轉(zhuǎn)染后較轉(zhuǎn)染前S 期細(xì)胞增多，G 1 期細(xì)胞減少，A 2 7 8 0 細(xì)胞和H e L a 細(xì)胞結(jié)果一致。A 2 7 8 0和h e L

6、 a 兩株細(xì)胞轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒后，對D D P 和V P 一1 6 的敏感性均較未轉(zhuǎn)染細(xì)胞明顯增加( P < 0 ：0 1 ) ，轉(zhuǎn)染p S I R E N —K u 7 0 s h R N A l 與轉(zhuǎn)染p S I R E N —D N A —P K c ss h R N A 2 結(jié)果是一致的。轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒的細(xì)胞對T P T 敏感性的變化兩株腫瘤細(xì)胞的結(jié)果不一致，A 2 7 8 0 細(xì)胞轉(zhuǎn)染p S l R E N ．K u 7 0

7、s h R N A l 或轉(zhuǎn)染p S I R E N —D N A —P K c ss h R N A 2 后細(xì)胞對T P T 的敏感性無明顯變化，H e L a 細(xì)胞轉(zhuǎn)染后較轉(zhuǎn)染前細(xì)胞對T P T 的敏感性明顯增加( P < 0 ．0 1 ) ，轉(zhuǎn)染p S I R E N —K u 7 0 s h R N A l 和轉(zhuǎn)染p S I R E N —D N A —P K c s s h R N A 2 的結(jié)果是一致的。結(jié)論：l 、K