DNA甲基化調(diào)控TRAIL受體基因的表達(dá)及滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性.pdf

1、本研究探討了DR4、DR5、DcR1和DcR2四種TRAIL受體在三種絨毛膜癌細(xì)胞系(JAR、JEG-3、BeWo)和兩種滋養(yǎng)層細(xì)胞系(HTR-8/SVneo、HPT-8)中的DNA甲基化水平和基因表達(dá)的關(guān)系。
　　通過(guò)對(duì)四種TRAIL受體的mRNA檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，DR4在JAR、JEG-3、BeWo和HTR-8/SVneo這四種細(xì)胞中均無(wú)表達(dá)，僅在HPT-8中表達(dá)，而DR5在以上五中細(xì)胞中都有表達(dá)。DcR1在JAR、JEG-3和B

2、eWo中有表達(dá)，而DcR2的表達(dá)則是出現(xiàn)于HTR-8/SVneo和HPT-8細(xì)胞中。通過(guò)對(duì)這四種TRAIL受體DNA啟動(dòng)子區(qū)甲基化的測(cè)序結(jié)果顯示，JAR、JEG-3、BeWo、HTR-8/SVneo這四種細(xì)胞中 DR4的啟動(dòng)子區(qū)處去超甲基化狀態(tài)；DcR1啟動(dòng)子區(qū)在HTR-8/SVneo和HPT-8中被檢測(cè)到是超甲基化的，同時(shí)DcR2的啟動(dòng)子區(qū)在JAR、JEG-3和BeWo中也被發(fā)現(xiàn)是處于超甲基化狀態(tài)。接著，我們?cè)谶@幾種滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)中使用

3、DNA去甲基化藥物5-aza，通過(guò)降低DR4，DcR1和DcR2基因的甲基化水平后觀察到這些基因均恢復(fù)了表達(dá)，而DR5的表達(dá)沒(méi)有發(fā)生改變，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示這幾種受體基因的表達(dá)和DNA甲基化水平呈明顯的負(fù)相關(guān)性。在進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)中，我們分析了所研究的五種細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡的敏感性，發(fā)現(xiàn)在正常狀態(tài)下只有HPT-8表現(xiàn)出對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的凋亡的高敏感性。而在對(duì)細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用5-aza-CdR后再檢測(cè)各自對(duì)TRAIL的敏感性發(fā)現(xiàn)，JAR，JEG-