甲苯磺酸索拉非尼治療晚期原發(fā)性肝細胞癌患者的臨床病理特征、生存預后分析及低氧誘導其耐藥機制研究.pdf

1、目的:回顧性收集并研究于我院口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期原發(fā)性肝細胞肝癌患者的臨床及病理資料，統(tǒng)計分析與甲苯磺酸索拉非尼片臨床療效相關的預后因素;探索低氧環(huán)境誘發(fā)的甲苯磺酸索拉非尼耐藥機制。
　　方法:回顧性收集了2005年1月至2013年1月期間于我院口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期HCC患者的臨床病理資料,收集這些患者的肝癌組織蠟塊標本并切片，應用SPSS19.9統(tǒng)計軟件對生存預后進行單因素分析及多因素分析;培養(yǎng)肝癌細胞系，進行W

2、estern Blot、PCR、CCK8毒性檢測、HIF1SiRNA轉染、免疫熒光染色等。
　　結果:(1)74例患者口服甲苯磺酸索拉非尼，中位隨訪時間為535天;其中64例為男性患者，10例為女性患者(6.4∶1)，中位年齡62歲，丙型肝炎既往史、較高的KPS評分、無腫瘤家族史的患者中位PFS相對較長;丙型肝炎既往史、AFP≤400，KPS評分≥90，高分化癌，不伴有吸煙史、飲酒史及腫瘤家族史的患者中位生存期較長;腫瘤家族史、乙

3、型肝炎、KPS評分70-80、低分化癌是生存的不良預后因素;飲酒既往史、乙型肝炎、KPS評分70-80是與甲苯磺酸索拉非尼片療效相關的不良預后因素;(2)口服甲苯磺酸索拉非尼片療效較差的臨床晚期HCC患者，免疫熒光染色顯示組織標本中HIF1α及YAP在細胞核內聚集，胞核陽性率較高，而臨床獲益明顯的患者肝癌組織中，HIF1α及YAP主要集中在細胞質;(3)在正常培養(yǎng)的肝癌細胞中,HIF1α及YAP均有少量表達，但重合率較低且主要集中在細胞

4、質，細胞核陽性率低;(4)肝癌細胞在常氧環(huán)境下加用甲苯磺酸索拉非尼，HIF1α及YAP主要集中在細胞質，細胞核陽性率進一步降低;(5)肝癌細胞在低氧環(huán)境下加用甲苯磺酸索拉非尼，HIF1α及YAP共同向核內遷移，細胞核陽性率升高;(6)低氧環(huán)境下，YAP、HIF1α表達升高且主要集中在細胞核，提示低氧環(huán)境可能促成肝癌細胞對甲苯磺酸索拉非尼產(chǎn)生抵抗力，促使產(chǎn)生耐藥;(7)當YAP主要集中在肝癌細胞核時， EMT相關指標E-鈣粘附減少，N-鈣

5、粘附素、波形蛋白表達水平相應增多，預示著YAP向細胞核內遷移現(xiàn)象與肝癌細胞的惡性程度及侵襲性密切相關;(8)正常培養(yǎng)的肝癌細胞中，細胞毒性檢測提示低氧狀態(tài)可能抵抗甲苯磺酸索拉非尼抗腫瘤效應，逆向促進腫瘤細胞增殖生長;(9) HIF1SiRNA轉染肝癌細胞，當HIF1α表達下調后，對其進行低氧及甲苯磺酸索拉非尼的處理，YAP的表達水平及向細胞核的遷移現(xiàn)象同前無明顯變化，但是細胞毒性檢測實驗顯示，肝癌細胞對索拉非尼的耐受性有所下降;(10)

6、 HIF1α及YAP蛋白在低氧誘導的甲苯磺酸索拉非尼耐藥機制中起到了一定的協(xié)同作用。
　　結論:(1)通過對口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期HCC患者的臨床病理資料及生存預后分析，我們發(fā)現(xiàn)肝炎病史、KPS評分、腫瘤家族史等臨床因素與患者的生存及甲苯磺酸索拉非尼片的療效存在密切關系，對該類臨床患者的治療及預后具有一定的指導意義;(2)低氧環(huán)境能夠抵抗甲苯磺酸索拉非尼部分抗腫瘤效應，誘導其耐藥的產(chǎn)生;(3)低氧環(huán)境下，YAP向細胞核內遷移