甲苯磺酸索拉非尼治療晚期原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者的臨床病理特征、生存預(yù)后分析及低氧誘導(dǎo)其耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的:回顧性收集并研究于我院口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌患者的臨床及病理資料，統(tǒng)計分析與甲苯磺酸索拉非尼片臨床療效相關(guān)的預(yù)后因素;探索低氧環(huán)境誘發(fā)的甲苯磺酸索拉非尼耐藥機(jī)制。
　　方法:回顧性收集了2005年1月至2013年1月期間于我院口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期HCC患者的臨床病理資料,收集這些患者的肝癌組織蠟塊標(biāo)本并切片，應(yīng)用SPSS19.9統(tǒng)計軟件對生存預(yù)后進(jìn)行單因素分析及多因素分析;培養(yǎng)肝癌細(xì)胞系，進(jìn)行W

2、estern Blot、PCR、CCK8毒性檢測、HIF1SiRNA轉(zhuǎn)染、免疫熒光染色等。
　　結(jié)果:(1)74例患者口服甲苯磺酸索拉非尼，中位隨訪時間為535天;其中64例為男性患者，10例為女性患者(6.4∶1)，中位年齡62歲，丙型肝炎既往史、較高的KPS評分、無腫瘤家族史的患者中位PFS相對較長;丙型肝炎既往史、AFP≤400，KPS評分≥90，高分化癌，不伴有吸煙史、飲酒史及腫瘤家族史的患者中位生存期較長;腫瘤家族史、乙

3、型肝炎、KPS評分70-80、低分化癌是生存的不良預(yù)后因素;飲酒既往史、乙型肝炎、KPS評分70-80是與甲苯磺酸索拉非尼片療效相關(guān)的不良預(yù)后因素;(2)口服甲苯磺酸索拉非尼片療效較差的臨床晚期HCC患者，免疫熒光染色顯示組織標(biāo)本中HIF1α及YAP在細(xì)胞核內(nèi)聚集，胞核陽性率較高，而臨床獲益明顯的患者肝癌組織中，HIF1α及YAP主要集中在細(xì)胞質(zhì);(3)在正常培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞中,HIF1α及YAP均有少量表達(dá)，但重合率較低且主要集中在細(xì)胞

4、質(zhì)，細(xì)胞核陽性率低;(4)肝癌細(xì)胞在常氧環(huán)境下加用甲苯磺酸索拉非尼，HIF1α及YAP主要集中在細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核陽性率進(jìn)一步降低;(5)肝癌細(xì)胞在低氧環(huán)境下加用甲苯磺酸索拉非尼，HIF1α及YAP共同向核內(nèi)遷移，細(xì)胞核陽性率升高;(6)低氧環(huán)境下，YAP、HIF1α表達(dá)升高且主要集中在細(xì)胞核，提示低氧環(huán)境可能促成肝癌細(xì)胞對甲苯磺酸索拉非尼產(chǎn)生抵抗力，促使產(chǎn)生耐藥;(7)當(dāng)YAP主要集中在肝癌細(xì)胞核時， EMT相關(guān)指標(biāo)E-鈣粘附減少，N-鈣

5、粘附素、波形蛋白表達(dá)水平相應(yīng)增多，預(yù)示著YAP向細(xì)胞核內(nèi)遷移現(xiàn)象與肝癌細(xì)胞的惡性程度及侵襲性密切相關(guān);(8)正常培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞中，細(xì)胞毒性檢測提示低氧狀態(tài)可能抵抗甲苯磺酸索拉非尼抗腫瘤效應(yīng)，逆向促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖生長;(9) HIF1SiRNA轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞，當(dāng)HIF1α表達(dá)下調(diào)后，對其進(jìn)行低氧及甲苯磺酸索拉非尼的處理，YAP的表達(dá)水平及向細(xì)胞核的遷移現(xiàn)象同前無明顯變化，但是細(xì)胞毒性檢測實驗顯示，肝癌細(xì)胞對索拉非尼的耐受性有所下降;(10)

6、 HIF1α及YAP蛋白在低氧誘導(dǎo)的甲苯磺酸索拉非尼耐藥機(jī)制中起到了一定的協(xié)同作用。
　　結(jié)論:(1)通過對口服甲苯磺酸索拉非尼片的晚期HCC患者的臨床病理資料及生存預(yù)后分析，我們發(fā)現(xiàn)肝炎病史、KPS評分、腫瘤家族史等臨床因素與患者的生存及甲苯磺酸索拉非尼片的療效存在密切關(guān)系，對該類臨床患者的治療及預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義;(2)低氧環(huán)境能夠抵抗甲苯磺酸索拉非尼部分抗腫瘤效應(yīng)，誘導(dǎo)其耐藥的產(chǎn)生;(3)低氧環(huán)境下，YAP向細(xì)胞核內(nèi)遷移