救必應(yīng)總黃酮的提取及對其產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機制研究.pdf

1、本文主要采用響應(yīng)面積法優(yōu)化救必應(yīng)總黃酮的超聲輔助提取工藝;采用二倍微量稀釋法、菌落計數(shù)法來測定救必應(yīng)黃酮類化合物及抗菌藥物的MIC及黃酮類化合物對產(chǎn)ESBLs大腸桿菌生長曲線的影響;采用微量棋盤法、聯(lián)合傳代法來測定黃酮類化合物聯(lián)合抗菌藥物后的抑菌效果;主要通過透射電鏡(TEM)、測定AKP活性、可溶性蛋白濃度、總蛋白合成量及DNA的熒光強度來研究救必應(yīng)黃酮類化合物對產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機理。主要結(jié)果如下:
　　1.在單因素試

2、驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面積法優(yōu)化超聲輔助提取救必應(yīng)總黃酮的最優(yōu)工藝為:乙醇濃度60％，液料比40∶1(mL/g)，超聲功率60％(420W)，超聲溫度55℃的條件下提取40min。
　　2.該菌株經(jīng)鑒定為產(chǎn)ESBLs大腸桿菌，其對頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿莫西林、磷霉素、林可霉素、阿米卡星、阿奇霉素、乙酰甲喹、氟苯尼考抗菌藥物耐藥，但對美羅培南、粘桿菌素敏感;救必應(yīng)總黃酮粗提物可明顯抑制大腸桿菌的生長并隨著濃度的

3、提高表現(xiàn)出明顯的抑菌殺菌作用;救必應(yīng)總黃酮粗提物與頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻呋、頭孢噻肟、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、阿奇霉素聯(lián)合作用后的均為0＜FICI≤0.5，表現(xiàn)為協(xié)同作用;與林可霉素、痢菌凈、磺胺間甲氧嘧啶聯(lián)合作用后的均為0.5＜FICI≤1，表現(xiàn)為相加作用。
　　3.救必應(yīng)總黃酮粗提物對產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌機理結(jié)果如下:TEM圖像表明救必應(yīng)總黃酮粗提物可明顯破壞大腸桿菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu);可使培養(yǎng)基中AK