ET-1調控缺氧誘導ANP分泌的磷脂酰肌醇-3-激酶信號轉導機制研究.pdf

1、目的:缺氧明顯促進心房內皮素-1(endothelin-1，ET-1)的生成及其釋放，并參與調節(jié)心房功能。然而，內源性ET-1調控心房鈉尿肽(atrial natriuretic peptide，ANP)分泌的具體機制尚不甚清楚。因此，本研究利用分子生物學、放射免疫、藥理學等技術觀察和探討內源性ET-1調控缺氧誘導ANP分泌的磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(pro

2、tein kinase B，Akt)信號轉導機制。
　　方法:本研究利用離體搏動的家兔心房灌流裝置制備急性缺氧模型，采用放射免疫技術檢測ET-1及ANP的含量，選用蛋白印跡技術(western blot，WB)分析內皮素A型和B型受體(endothelin receptor type A and B，ETRA and ETRB)的表達和Akt及GATA結合蛋白-4（GATA biding protein-4，GATA-4）含量的變

3、化。
　　結果:1.急性缺氧明顯促進家兔心房ET-1的釋放(n=6，P＜0.001 vs.controlperiod)，并顯著上調ETRA及ETRB表達(n=5，P＜0.001 and P＜0.01 vs.controlgroup)。同時顯著增加心房ANP的分泌，并明顯抑制心房搏出量和搏動壓(n=6，P＜0.001 vs.control period)。2.ETRA和ETRB的抑制劑BQ123（0.3μmol/L）及BQ788（0

4、.3μmol/L）明顯減緩缺氧誘導ANP分泌的效應(n=6，P＜0.01 vs.controlperiod)。3.PI3K/Akt的抑制劑LY294002（30.0μmol）也可明顯抑制缺氧誘導ANP分泌的作用(n=6，P＜0.001 vs.hypoxia)。4.急性缺氧明顯增加磷酸化Akt(phospho Akt，pAkt)和GATA4的含量（均n=5，P＜0.001 vs.control）。5.BQ123和BQ788則可明顯減緩缺氧