丹酚酸A通過(guò)抑制3羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)途徑降低血小板激活和動(dòng)脈血栓形成.pdf

1、目的:動(dòng)脈粥樣硬化疾病是西方發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率和死亡率最高的疾病,而且也是我國(guó)主要的死亡原因。血小板在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著非常重要的作用。丹參是亞洲廣泛用于治療動(dòng)脈粥樣硬化血栓性疾病的一種中藥,而丹酚酸A是其中的一種主要水溶性成分。本研究探索了丹酚酸A對(duì)血小板活性的影響及其可能的作用機(jī)制。
　　 方法和結(jié)果:重要的血小板激活刺激劑ADP,凝血酶,膠原和血栓烷A2類似物U46619所引起血小板聚集能被丹酚酸A顯著抑制,而且丹

2、酚酸A的抑制作用呈濃度依賴性。另外應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)單個(gè)血小板激活時(shí),發(fā)現(xiàn)丹酚酸A對(duì)ADP和凝血酶刺激引起的P選擇素表達(dá)和纖維蛋白原結(jié)合有顯著的抑制作用。流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)同時(shí)也證明丹酚酸A可以抑制血小板-白細(xì)胞聚集體的形成。丹酚酸A還可以抑制血小板在固定的纖維蛋白原上的鋪展,這說(shuō)明丹酚酸A可以抑制血小板從外到內(nèi)的信號(hào)通路(Outside-in signaling)。在相當(dāng)于體內(nèi)動(dòng)脈流速的剪切力(1000s-1)下,丹酚酸A可以抑制血小板

3、在固定膠原上的粘附,抑制率大概為40％。免疫印跡分析顯示,丹酚酸A抑制了血小板Akt的磷酸化,因此它的作用靶點(diǎn)可能是3羧基磷脂酰肌醇激酶(PI3K)。通過(guò)應(yīng)用PI3K的抑制劑LY294002和TGX-221進(jìn)行對(duì)比和疊加實(shí)驗(yàn),證實(shí)了丹酚酸A的作用靶點(diǎn)是PI3K的β亞型。最后體外實(shí)驗(yàn)的作用在我們體內(nèi)實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證。在體內(nèi)動(dòng)脈血栓模型中,丹酚酸A可以顯著延長(zhǎng)野生型小鼠腸系膜動(dòng)脈血管堵塞的時(shí)間(對(duì)照組:35±2 min,丹酚酸A處理組:56±