NF-κB、TLR4、ZO-1在SAP大鼠腸粘膜中的表達(dá)及清胰湯的干預(yù)作用.pdf

1、目的:構(gòu)建SAP大鼠模型，通過檢測相關(guān)血液指標(biāo)及病理組織觀察，了解SAP大鼠腸道損傷及腸道通透性改變情況;觀察SAP大鼠腸粘膜細(xì)胞NF-κB P65、TLR4、ZO-1表達(dá);探討清胰湯對SAP大鼠腸粘膜損傷時(shí)的保護(hù)機(jī)制。
　　方法:清潔級(jí)SD大鼠54只，雄性，體重280±20g。隨機(jī)分為三組:SO組（翻動(dòng)后即關(guān)腹）、SAP組（注射?；悄懰徕c構(gòu)建模型）、清胰湯組（術(shù)后立即予以湯劑灌胃，1ml/100g/次，每12h一次）。每組分為三

2、個(gè)時(shí)刻:12h、24h、48h，各時(shí)刻均為6只大鼠。于下腔靜脈穿刺抽取靜脈血，用于血淀粉酶、內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和血清D-乳酸濃度檢測。胰腺及腸道組織分別用于HE染色及免疫組織化學(xué)染色，然后觀察胰腺及腸道組織病理變化以及NF-κB、TLR4、ZO-1在小腸粘膜的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:(1)血淀粉酶檢測:SAP組血清淀粉酶水平在三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組顯著升高(P＜0.05）;清胰湯組血清淀粉酶水平在12h、24h和48h三個(gè)

3、時(shí)刻均相較于SAP組明顯降低，而相較于SO組則明顯上升(P＜0.05）。(2)血清內(nèi)毒素檢測:SAP組內(nèi)毒素水平在24h存在峰值，且與清胰湯組在三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組顯著升高(P＜0.05)。清胰湯組血清內(nèi)毒素水平在各時(shí)刻均相較于SAP組降低，并且差異在12h和48h具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。(3)細(xì)胞因子測定:SAP組IL-6及TNF-α水平均在24h最高，且在三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組顯著升高(P＜0.05);清胰湯組則在各時(shí)刻均

4、相較于SO組上升(P＜0.05)，而相較于SAP組則明顯下降。其中，TNF-α在三個(gè)時(shí)刻均具有統(tǒng)計(jì)顯著性(P＜0.05)，而IL-6在12h和48h兩個(gè)時(shí)刻具有統(tǒng)計(jì)顯著性(P＜0.05)。(4)血清D-乳酸檢測:SAP組血清D-乳酸水平在12h存在高峰，并且在此后隨時(shí)間推移而逐漸降低(P＜0.05);SAP組血清D-乳酸水平在12h和24h兩個(gè)時(shí)刻均相較于SO組明顯上升(P＜0.05);清胰湯組D-乳酸水平在12h和24兩個(gè)時(shí)刻均相較于

5、SAP組顯著下降，而相較于SO組則明顯上升(P0.05）。(5)胰腺病理評(píng)分:SAP組胰腺組織病理評(píng)分在12h、24h、48h三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組顯著增加(P＜0.05);清胰湯組胰腺組織病理評(píng)分在三個(gè)時(shí)刻相較于SAP組均顯著降低，而相較于SO組則均顯著升高(P＜0.05）。(6)小腸病理評(píng)分:SAP組回腸組織病理評(píng)分在12h、24h和48h三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組升高(P＜0.05);清胰湯組回腸組織病理評(píng)分在三個(gè)時(shí)刻均相較于SAP組

6、顯著減少，而相較于SO組則明顯增加(P＜0.05）。(7)腸粘膜上皮NF-κB P65的表達(dá):在SAP組中，腸粘膜NF-κB表達(dá)于12h到達(dá)高峰，24h及48h隨時(shí)間的遞增而減少，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); SAP組腸粘膜細(xì)胞NF-κB表達(dá)在三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組上調(diào)，且差異在12h存在統(tǒng)計(jì)顯著性(P＜0.05);清胰湯組腸粘膜細(xì)胞NF-κB表達(dá)在12h和24h明顯高于SO組，而相較于SAP組則明顯下調(diào)，并且在12h具有統(tǒng)計(jì)

7、顯著性(P0.05）。
　　(8)腸粘膜上皮TLR4的表達(dá):在SAP組中，腸粘膜細(xì)胞TLR4的表達(dá)于12h到達(dá)高峰，24h及48h隨時(shí)間的遞增而減少(P＜0.05); SAP及清胰湯組腸粘膜細(xì)胞TLR4表達(dá)在三個(gè)時(shí)刻均相較于SO組明顯上調(diào)(P＜0.05);在12h，清胰湯組腸粘膜細(xì)胞TLR4表達(dá)顯著高于SO組，而相較于SAP組則顯著下調(diào)(P＜0.05）;(9)腸粘膜上皮ZO-1的表達(dá):SAP及清胰湯組腸粘膜ZO-1表達(dá)在三個(gè)時(shí)刻均

8、相較于SO組顯著下調(diào)(P＜0.05);清胰湯組腸粘膜ZO-1表達(dá)在三個(gè)時(shí)刻均相較于SAP組顯著上調(diào)，而相較于SO組顯著下調(diào)(P＜0.05）。
　　結(jié)論:(1)、SAP大鼠早期即存在腸道病理改變以及腸粘膜屏障的損傷。(2)、SAP大鼠伴有腸粘膜細(xì)胞TLR4和NF-κB P65表達(dá)的上調(diào)以及ZO-1表達(dá)的下調(diào)。(3)、清胰湯可顯著減輕SAP大鼠胰腺及小腸損傷、減少腸道細(xì)菌及內(nèi)毒素易位，減少炎性因子的釋放，糾正腸粘膜緊密連接的異常、保護(hù)