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文檔簡介
1、目的:探討從SD乳鼠皮下脂肪組織及坐骨神經中獲取許旺細胞以及應用超順磁性納米鐵顆粒(SPIO)體外標記許旺細胞的可行性。
方法:顯微鏡下切取SD 乳鼠皮下脂肪組織,差速分離純化獲得類許旺細胞,研究其生物學特性及組織內定位,并應用于硅膠管內,修復10mm 長坐骨神經缺損。切取乳鼠坐骨神經,應用Dispase II 酶純化獲得許旺細胞。應用SPIO 標記后,行普魯士藍染色、透射電鏡及MTT 檢測,研究標記后許旺細胞的生物學特性
2、及MRI 成像示蹤。
結果:從SD乳鼠皮下脂肪組織中分離純化的類許旺細胞,表達許旺細胞特異性標記,其陽性部位在小血管周圍。術后4 周,神經再生已通過橋接神經的硅膠管,長至坐骨神經的遠端。經過Dispase II 酶的差速純化,可以從SD 乳鼠坐骨神經中獲得大量高純度的許旺細胞。將SPIO 與許旺細胞共同培養(yǎng)24 小時后,普魯士藍染色見細胞內藍染的鐵顆粒,透射電鏡證實鐵顆粒位于細胞的吞噬泡或溶酶體中,體外MRI 呈明顯的低信
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