乙型肝炎病毒DNAX蛋白突變預測乙肝相關性肝細胞肝癌患者術后生存率的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學學位論文使用授權及知識產(chǎn)權歸屬承諾本學位論文在導師( 或指導小組) 的指導下，由本人獨立完成。本學位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權歸河北醫(yī)科大學所有。河北醫(yī)科大學有權對本學位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學位論文主要內(nèi)容相關的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權均歸河北醫(yī)科大學所有。否則，承擔相應法律責任。 ，·j ≥”：i ≯、、／ ≤≯衛(wèi)一7 ’一I ? 一+研究

2、生躲塒導師擗爺二級學麓I j j | 。，l 硒年> 月刁日I7 ～f河北醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。珊雌轢叫 新纛岔7 日 沖，年b 月刁日中文摘要乙型肝炎病毒D N A X 蛋白突變預測乙肝相關性肝細胞肝癌患者術后生存率的研究摘 要目的：構

3、成乙型肝炎病毒基因組的4 個讀碼框是重疊開放的，各自編碼一種蛋白。其中X 基因重疊包繞啟動子與增強子2 ，前核心區(qū)和核心區(qū)域的轉錄作用受以上兩個因子控制。由于乙型肝炎病毒聚合酶的校對缺陷，導致乙型肝炎病毒D N A 容易發(fā)生突變。H B V 基因型和病毒D N A 載量均和乙肝相關性肝細胞肝癌的發(fā)病相關聯(lián)，除此之外，前S 1 、前S 2 、B C P 和增強子2 區(qū)域的基因突變也參與到乙肝相關性肝細胞肝癌的風險的病例對照研究中。有研究表

4、明這上述區(qū)域中的幾種基因突變與肝細胞癌的發(fā)展存在相關性。然而，目前只有少數(shù)針對乙肝相關性肝細胞肝癌患者中上述基因突變的預后價值的研究，尤其針對H B X 基因區(qū)域。通過測定肝組織樣本中乙型病毒性肝炎D N A ，Y e h 等人發(fā)現(xiàn)核心啟動子組分A 1 7 5 2 T ／1 7 6 4 A 的突變是肝細胞癌患者術后預后的獨立預測因子。在當前的研究中我們通過利用來自乙肝相關性肝細胞肝癌患者肝癌組織樣本中的乙肝病毒D N A 測定出乙型肝炎

5、病毒X 的基因序列，并用該序列來鑒定識別與術后生存相關的基因突變序列。方法：1 研究對象及隨訪：選取2 0 0 7 ．2 0 0 9 兩年間在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院肝膽外科行肝癌切除術的患者，通過影像學檢查、組織病理明確診斷為肝細胞肝癌。采集肝細胞癌患者術中切除的肝癌組織標本，并準確記錄所有患者的性別、年齡、腫瘤大小、T N M 分期、C h i l d 分級等臨床特征。通過門診復查、電話等方式隨訪肝癌患者術后的生存情況，隨訪時間截止到2

6、 0 1 4 年1 2 月。2 基因組D N A 提取、擴增及測序：用D N A 純化試劑盒提取肝癌組織標本的基因組D N A ，鑒定合格后，采用P C R 技術擴增目的片段，設計兩對引物對目的片段進行擴增，引物分別為：H B V I F ：5 ' - A T G C G T G G A A C C T T T G T G ．3 ’，H B V l R ：5 ' - T C G G T C G T T G A C A T