人臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞對耐維甲酸的早幼粒白血病細(xì)胞分化的研究.pdf

1、第一部分人臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞對耐維甲酸的早幼粒白血病細(xì)胞分化的研究
　　研究背景及目的:間充質(zhì)干細(xì)胞具有自我更新和多向分化的潛能，近年來用間充質(zhì)干細(xì)胞治療腫瘤疾病的研究越來越多。主要是間充質(zhì)干細(xì)胞通過抗癌分子，例如分泌干擾素、白介素和凋亡誘導(dǎo)物來起到抗癌的作用。耐維甲酸的急性早幼粒白血病細(xì)胞(NB4-R2)是由于維甲酸受體部分染色特的缺失引起的維甲酸耐藥。利用間充質(zhì)干細(xì)胞和全反式維甲酸聯(lián)合，通過降解維甲酸受體PML-RARα，

2、來影響NB4-R2細(xì)胞向粒系分化，同時可以抑制NB4-R2增殖。
　　方法:(1)利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞表面標(biāo)記，瑞氏吉姆薩染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化;(2)CCK-8細(xì)胞活力試劑盒檢測MSC對NB4-R2增殖的影響;(3)流逝細(xì)胞術(shù)PI檢測細(xì)胞周期的變化。(4)Real-time PCR檢測C/EBPB、C/EBPε和PML-RAR alpha mRNA的表達(dá)水平;(5)western-blotting檢測蛋白PML-RAR alph

3、a的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果與討論:本次實(shí)驗(yàn)研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞與維甲酸聯(lián)合使用可以對耐維甲酸的急性早幼粒白血病的分化有著重要的影響。
　　第二部分臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對乳腺癌細(xì)胞系MCF-7裸鼠移植瘤生長的影響研究
　　背景:間充質(zhì)干細(xì)胞不但就有多向分化能力，而且可以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。目前已有臨床前和臨床研究資料表明，間充質(zhì)干細(xì)胞對預(yù)防和治療異基因造血干細(xì)胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)、自身免疫性疾病以及糖尿病等具有顯

4、著療效。在臨床應(yīng)用過程的的安全性是至關(guān)重要的，其是否會促進(jìn)體內(nèi)腫瘤生長是其安全性的一個重要方面，但目前這部分內(nèi)容研究尚少。
　　目的:以人乳腺癌細(xì)胞MCF-7荷瘤小鼠為模型，進(jìn)行臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對MCF-7荷瘤裸鼠腫瘤生長影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。
　　方法:研究利用臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞尾靜脈注射MCF-7荷瘤BALB/c裸小鼠。試驗(yàn)設(shè)3個劑量組，分別為4×104、2×105和1×106個/只，共給予兩次，間隔兩周;另設(shè)未荷瘤的正常

5、對照組和腫瘤模型對照組。每組8只動物，MCF-7荷瘤裸鼠模型觀察周期為6周，試驗(yàn)期間觀察了UC-MSCs對荷瘤鼠腫瘤生長的影響。MCF-7荷瘤裸鼠模型試驗(yàn)結(jié)果顯示，模型對照組腫瘤體積呈持續(xù)增長趨勢，觀察結(jié)束后各劑量組與同期模型對照組動物相比，UC-MSCs有抑制腫瘤體積及重量的趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，病理組織學(xué)結(jié)果顯示中高劑量組各有1只動物肺臟可見轉(zhuǎn)移瘤。
　　結(jié)果:綜上所述，UC-MSCs不促進(jìn)MCF-7裸鼠的生長，但可促進(jìn)MCF