UVB對(duì)人上皮細(xì)胞損傷作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　探討中波紫外線（UVB）對(duì)人上皮細(xì)胞（人胃癌細(xì)胞SGC-7901、人永生化表皮細(xì)胞）的損傷作用，建立UVB損傷人上皮細(xì)胞的模型，探討損傷機(jī)理，為世居高原人群的罕見病高發(fā)提供病因研究線索。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞SGC-7901、人永生化表皮細(xì)胞HaCaT兩種上皮細(xì)胞，然后分為四組，一組對(duì)照組，另外三組分別是低、中、高劑量照射組。其中人胃癌細(xì)胞的照射劑量6mJ/cm2、12mJ/cm2、18mJ/

2、cm2；HaCaT細(xì)胞的照射劑量為10mJ/cm2、30mJ/cm2、60mJ/cm2紫外線照射組，每組5個(gè)平行樣本。照射后12h進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)指標(biāo)有人胃癌細(xì)胞SGC-7901增殖活性（MTT法），人胃癌細(xì)胞SGC-7901形態(tài)（光學(xué)顯微鏡下觀察），人胃癌細(xì)胞SGC-7901凋亡形態(tài)（熒光顯微鏡），人永生化表皮細(xì)胞凋亡率（流式細(xì)胞術(shù)FCM），人永生化表皮細(xì)胞DNA損傷（單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)）。
　　結(jié)果：
　　1、UVB照射人

3、胃癌細(xì)胞SGC-7901后可使其吸光度值下降，對(duì)照組、6、12、18mJ/cm2紫外線照射組細(xì)胞吸光度值分別為0.671±0.179，0.318±0.009，0.257±0.201，0.197±0.156，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　2、UVB照射人胃癌細(xì)胞SGC-7901后，在形態(tài)學(xué)上可見細(xì)胞形態(tài)腫脹變圓，失去與鄰近的細(xì)胞的連接，細(xì)胞出現(xiàn)脫落，且細(xì)胞損傷程度與照射劑量有劑量依賴性。
　　3、UVB照射可誘

4、導(dǎo)人胃癌細(xì)胞SGC-7901發(fā)生凋亡。
　　4、UVB照射人永生化表皮細(xì)胞可誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡，且劑量越大細(xì)胞凋亡率越高。對(duì)照組、10、30、60mJ/cm2紫外線照射組細(xì)胞早期凋亡率分別為1.2±0.14，2.23±0.37，4.13±0.29，5.97±0.17，晚期凋亡率分別為2±0.13，7.63±0.52，23.36±0.98，40.46±1.39，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　5、UVB照射人永生化表

5、皮細(xì)胞可使其細(xì)胞尾矩和Olive尾矩增大，且照射劑量越大，尾矩和Olive尾矩越大。對(duì)照組、10、30、60mJ/cm2紫外線照射組細(xì)胞DNA尾矩分別為0.13±0.25，21.78±2.31，53.48±5.66，79.16±7.47，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），Olive尾矩分別為0.32±0.47，16.17±1.96，36.43±2.89，51.71±1.87，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　結(jié)論