硫丹誘導(dǎo)miR-22表達(dá)變化與HUVEC-C細(xì)胞損傷的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、硫丹，是一種有機(jī)氯農(nóng)藥，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，并在2011年被斯德哥爾摩公約列入禁用的持久性有機(jī)污染物，具有持久性、高毒性和生物富集特征，與人類(lèi)疾病尤其是心血管疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，對(duì)人類(lèi)的健康構(gòu)成了潛在的威脅。其生物毒性考慮與硫丹對(duì)細(xì)胞的直接損傷和對(duì)細(xì)胞功能的影響密不可分。已有研究顯示硫丹具有多種細(xì)胞毒性，但其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的毒性研究尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　本研究著重探討了不同劑量硫丹對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC-C)的毒性劑量效應(yīng)關(guān)系;從分

2、子水平和蛋白質(zhì)水平分析了參與調(diào)控細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡的通路，炎癥因子的變化及轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子miR-22的作用機(jī)制。結(jié)果表明，硫丹能夠引起血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性，表現(xiàn)為細(xì)胞存活率降低，從20μM開(kāi)始出現(xiàn)極顯著的細(xì)胞增殖抑制作用（P＜0.01），并具有劑量依賴(lài)性。硫丹在高劑量下(60μM)通過(guò)CDK6/pRb通路誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯在G1期，在較高劑量下(40μM和60μM)通過(guò)線(xiàn)粒體凋亡通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并且促發(fā)炎癥因子IL-6的分泌及上調(diào)IL-

3、6，IL-8的基因表達(dá)，提示硫丹暴露能夠造成血管內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)。此外，硫丹特異性地誘導(dǎo)miR-22的表達(dá)上調(diào)，具有時(shí)間和劑量依賴(lài)性關(guān)系。通過(guò)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-22過(guò)表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡并使得炎癥因子IL-8的相對(duì)mRNA表達(dá)水平升高，但與細(xì)胞周期的阻滯無(wú)關(guān)，提示miR-22可能參與調(diào)控硫丹誘導(dǎo)的HUVEC-C細(xì)胞的凋亡和炎癥反應(yīng)過(guò)程。
　　本研究明確了硫丹具有內(nèi)皮細(xì)胞毒性，能夠?qū)е聝?nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)，闡明了硫丹引起人內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)