肝損傷后炎癥因子表達與細胞周期變化的研究.pdf

1、目的:
　　研究肝損傷后炎癥因子IL-6、MCP-1、TGF-β、TNF-α表達水平的變化，及肝損傷后肝細胞周期變化，旨在探討肝損傷后炎癥因子與細胞周期之間的關(guān)系，為肝臟疾病臨床治療提供思路。
　　方法:
　　1、HepG2細胞株培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基。細胞生長至對數(shù)期時，用不同濃度乙醇對細胞進行處理，共分為三組（空白對照組、0.001M、0.01M），應用qRT-PCR技術(shù)檢測不同濃度乙醇作用后細胞中mRNA的表達量。

2、
　　2、Hep3B細胞株培養(yǎng)于MEM培養(yǎng)基，HepG2和L02細胞株培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基，三系細胞在不同濃度乙醇或四氯化碳處理24小時后，采用流式細胞周期儀檢測各組細胞周期變化。用不同濃度四氯化碳作用L02細胞3小時、6小時、12小時、24小時后檢測各組細胞周期變化，用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析處理，每個樣品至少重復三次實驗。
　　結(jié)果:
　　1 Real-Time PCR結(jié)果
　　與空白對照組相比，

3、乙醇濃度為0.001M、0.01M時IL-6mRNA的表達水平增高；且乙醇濃度為0.01M時，差異具有顯著統(tǒng)計學意義（以 actin作為內(nèi)參， P<0.05）。
　　與空白對照組相比，乙醇濃度為0.001M、0.01M時MCP-1mRNA的表達水平增高；且乙醇濃度為0.01M時，P<0.01，差異具有顯著統(tǒng)計學意義。
　　與空白對照組相比，0.001M組和0.01M組TGF-βmRNA表達水平有所增高，且乙醇濃度為0.001

4、M時，P<0.001，差異有顯著統(tǒng)計學意義。
　　與空白對照組相比，0.001M組和0.01M組TNF-αmRNA的表達水平有所增高，乙醇濃度為0.001M時，P<0.05，差異有顯著統(tǒng)計學意義。
　　2細胞周期檢測結(jié)果
　　不同濃度乙醇和四氯化碳作用Hep3B、HepG2和L02細胞后，可見各組細胞G2期細胞比例有所增多。不同濃度CCl4處理L02細胞3、6、12、24小時后，見隨著CCl4作用時間延長，G2期細胞百