氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪抗小鼠強迫應激及慢性應激誘導的抑郁樣作用研究.pdf

1、目的：研究氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪對強迫應激及慢性不可預知性應激抑郁模型中小鼠的抗抑郁樣作用及其可能的作用機制。
　　方法：（1）小鼠強迫應激模型：小鼠根據(jù)預實驗剔除不動時間差異較大的，其余小鼠均衡隨機分為：溶劑對照組、氟西汀陽性藥對照組(10 mg/kg)、氟西汀(10 mg/kg)和拉莫三嗪(10 mg/kg)聯(lián)合用藥組。其中溶劑對照組每日灌胃等量的0.5％羧甲基纖維素鈉溶液，其余兩組按設計好的劑量灌胃氟西汀和拉莫三嗪，均連續(xù)灌胃7

2、天。采用小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗中小鼠不動時間以及曠場實驗中小鼠直立次數(shù)、穿越底面塊數(shù)和中央格停留時間作為初次篩選抗抑郁藥的指標，對氟西汀和拉莫三嗪聯(lián)合用藥的抗抑郁作用進行初步評價。
　?。?）小鼠慢性應激模型：小鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、氟西汀組(10 mg/kg)、氟西汀(10 mg/kg)和拉莫三嗪(10 mg/kg)聯(lián)合用藥小劑量組、氟西汀(10 mg/k g)和拉莫三嗪(20 mg/kg)聯(lián)合用藥大劑量組。除正

3、常對照組外，其余4組小鼠經(jīng)歷4周慢性不可預知性溫和應激。應用隨機方法將11種刺激因子隨機分配到每周7天從而建立慢性不可預知性溫和應激模型(Chronic unpredicted mild stress，CUMS)。小鼠造模1周后開始灌胃，其中正常對照組不給予任何藥物，模型對照組每天灌胃等量的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，其他各組按預實驗計劃量灌服氟西汀和拉莫三嗪，均連續(xù)給藥3周。于實驗前1天（0 day，0d）、實驗第7、14、21、28

4、天分別測量小鼠體重并記錄，同時進行肛溫檢測和蔗糖水消耗實驗。造模結束后，小鼠迅速脫頸椎處死并取腦組織制備相應濃度的組織勻漿液以備含量測定。
　　（3）小鼠腦組織單胺類遞質及抗氧化指標檢測：通過抑制單胺遞質去甲腎上腺素（Norepinephrine，NE）重攝取實驗和酶聯(lián)免疫吸附測定方法(enzyme-linked immu-neosorbent assay，ELISA)檢測小鼠腦組織中5-羥色胺(5-hydroxytryptami

5、ne，5-HT)的含量，研究其抗抑郁中對單胺遞質部分的作用機制。采用分光光度法分別檢測小鼠腦組織中抗氧化系統(tǒng)超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondi-aldehyde，MDA）、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）的含量，研究其抗抑郁中對抗氧化系統(tǒng)部分的作用機制。
　　結果：(1)小鼠懸尾實驗中，與溶劑對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)及聯(lián)合用藥組小鼠懸尾不動時間均顯著

6、縮短(P<0.05，P<0.01)。小鼠強迫游泳實驗中，與溶劑對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組小鼠強迫游泳不動時間均顯著縮短（P<0.05，P<0.05）。小鼠曠場實驗中，與溶劑對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組在小鼠水平活動、直立行為和中央格停留時間上均無顯著性差異(P>0.05)。
　　(2) CUMS模型小鼠的體重在造模前1天，各組小鼠的體重基本一致，無顯著性差異(P>0.05)，具有可

7、比性；造模第7天（給藥前一天），與正常對照組比較，模型對照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠體重均顯著降低(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；造模第14天，與正常對照組比較，模型對照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥各劑量組小鼠體重降低均顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；造模第21天，與正常對照組比較，模型對照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合

8、用藥各劑量組小鼠體重降低均顯著（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）；在造模第28天，相比正常對照組，模型對照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量組小鼠體重均降低顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)，其中與模型對照組比較，聯(lián)合用藥大劑量組小鼠體重顯著升高(P<0.05)。
　　CUMS模型肛溫檢測中，在造模前1天，各組小鼠的肛溫基本一致，無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性；造模第7

9、天，各組小鼠的肛溫也無顯著性差異(P>0.05)；造模第14天，與正常對照組比較，模型對照組小鼠肛溫略有下降，與模型對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組小鼠肛溫略有升高，但均無顯著性差異(P>0.05)；造模第21天，與正常對照組比較，模型對照組小鼠肛溫顯著降低(P<0.01)，與模型對照組比較，聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠肛溫均有顯著性升高(P<0.01，P<0.01)；造模第28天，與正常對照組比較，模型對照組小鼠肛

10、溫顯著性降低(P<0.01)，與模型對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)小鼠肛溫升高顯著(P<0.05)，聯(lián)合用藥各劑量組小鼠肛溫升高均具有顯著性統(tǒng)計學意義(P<0.01，P<0.01)。
　　CUMS模型蔗糖水消耗實驗中，造模第21天，與正常對照組比較，模型對照組小鼠的絕對蔗糖飲水量、相對蔗糖飲水量以及糖水偏愛百分比均明顯降低，但均無顯著性差異(P>0.05)，與模型對照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥小劑量和

11、大劑量組的絕對蔗糖飲水量和相對蔗糖飲水量均有升高，但均無顯著性差異(P>0.05)，其中聯(lián)合用藥小劑量組小鼠的糖水偏愛百分比升高顯著(P<0.05)；造模第28天，相比正常對照組，模型對照組小鼠絕對蔗糖飲水量降低顯著(P<0.01)、相對蔗糖飲水量顯著降低(P<0.05)，造模各組小鼠糖水偏愛百分比均有下降，其中模型對照組小鼠糖水偏愛百分比降低顯著(P<0.01)；與模型對照組相比，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組

12、小鼠絕對蔗糖飲水量均有升高且均具有顯著性統(tǒng)計學意義(P<0.01，P<0.01，P<0.01)，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠相對蔗糖飲水量顯著升高(P<0.05，P<0.05，P<0.01)，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠糖水偏愛百分比升高均顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)。
　　(3)小鼠抑制單胺遞質去甲腎上腺素(NE)重攝取實驗中，與溶劑對照組比較，氟西

13、汀組(10 mg/kg)的小鼠死亡率略有升高，但無顯著性差異(P>0.05)，而聯(lián)合用藥組小鼠死亡率升高具有顯著性差異(P<0.05)。小鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質5-羥色胺(5-HT)含量檢測結果表明，與正常對照組比較，造模各組小鼠腦中5-羥色胺(5-HT)含量均有下降，其中模型對照組、氟西汀組和聯(lián)合用藥小劑量組小鼠腦中5-羥色胺(5-HT)的含量降低顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)；與模型對照組比較，氟西汀組和聯(lián)合用藥

14、小劑量和大劑量組小鼠腦內(nèi)5-羥色胺(5-HT)含量均顯著升高(P<0.05，P<0.05，P<0.01)。
　　在小鼠腦組織抗氧化系統(tǒng)部分主要進行了小鼠腦組織蛋白含量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)四項含量檢測。結果顯示，相比于正常對照組，模型對照組小鼠腦內(nèi)SOD活力顯著降低(P<0.05)，MDA含量升高顯著(P<0.05)，GSH含量顯著降低(P<0.05)；與模型對照組對比，聯(lián)合用藥大劑量組小

15、鼠腦內(nèi)SOD活力升高非常明顯，其差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)，聯(lián)合用藥大劑量組小鼠腦內(nèi)MDA含量顯著降低(P<0.05)，聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠腦組織中谷胱甘肽(GSH)含量升高均非常明顯，其差異均有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01，P<0.01)。
　　結論：氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪可顯著改善小鼠的抑郁樣行為，其抗抑郁的作用機制可能與上調腦組織中單胺類神經(jīng)遞質5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NE)的含量以及改善腦組織氧