豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預(yù)對大鼠抑郁樣行為、MBP及CNP的影響.pdf

1、背景：
　　抑郁癥已經(jīng)成為全球重要的的公共衛(wèi)生問題。研究表明抑郁癥患者大腦前額葉、胼胝體、海馬區(qū)等部位的腦白質(zhì)的完整性明顯缺損。腦白質(zhì)有大量的神經(jīng)纖維束組成，起著神經(jīng)信號的傳導(dǎo)作用。大量研究證實(shí)腦白質(zhì)的損傷與抑郁癥的發(fā)生密切相關(guān)。豐富環(huán)境可以增加腦白質(zhì)有髓神經(jīng)纖維總長度和總體積，還可以促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞的增生，短期氟西汀治療能夠提高抑郁癥患者腦白質(zhì)的完整性。本研究建立慢性不可預(yù)見性應(yīng)激（chronic unpredictable s

2、tress，CUS）刺激制備抑郁模型大鼠，使用豐富環(huán)境及氟西汀為干預(yù)方式，以前額葉、胼胝體、海馬區(qū)為目標(biāo)腦區(qū)，探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預(yù)對慢性應(yīng)激所致抑郁大鼠行為學(xué)以及腦白質(zhì)的影響。
　　目的：
　　1.探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預(yù)對慢性應(yīng)激所致抑郁大鼠行為學(xué)的影響。
　　2.探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預(yù)對抑郁大鼠腦白質(zhì)中髓鞘指標(biāo)（髓鞘堿性蛋白）、以及少突膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物（2'-3'環(huán)核苷酸-3'-磷酸二酯酶）的影響。

3、>　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動物分組以及抑郁模型的建立
　　SPF級雄性SD大鼠65只，采用曠場試驗(yàn)對所有大鼠評估，不合格的剔除。按照隨機(jī)抽樣的方法分配10只大鼠為正常對照(A)組，標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境飼養(yǎng)。使用CUS法對剩余大鼠進(jìn)行抑郁模型的建立。造模后隨機(jī)抽樣40只抑郁大鼠，分配為抑郁模型(B)組、氟西汀(C)組、豐富環(huán)境(D)組、豐富環(huán)境+氟西汀(E)組。
　　2.氟西汀及豐富環(huán)境干預(yù)
　　對于C組大鼠，給予抗抑郁藥氟西

4、汀10 mg/kg.d灌胃;對于D組大鼠，給予豐富環(huán)境12 h/d干預(yù);對于E組大鼠，給予抗抑郁藥氟西汀10 mg/kg.d灌胃，同時給予給予豐富環(huán)境12 h/d干預(yù)。
　　3.行為學(xué)評估
　　采用體質(zhì)量的變化、蔗糖水消耗量實(shí)驗(yàn)、曠場實(shí)驗(yàn)三種方式分別在CUS刺激前、CUS刺激第21d，分別在氟西汀干預(yù)及豐富環(huán)境干預(yù)的第1周末、第2周末、第3周末評估大鼠的行為學(xué)變化。
　　4.MBP、CNP蛋白含量及mRNA表達(dá)測定的實(shí)

5、驗(yàn)方法
　　使用免疫組化方法檢測大鼠海馬各區(qū)、前額葉區(qū)、胼胝體中MBP、CNP蛋白的含量;使用RT-PCR技術(shù)檢測大鼠海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBP mRNA、CNP mRNA的表達(dá)量。
　　5.統(tǒng)計方法
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS20.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析。多組計量資料采用單因素方差分析（one-way ANOVA）;兩兩比較時，方差齊時用LSD法檢驗(yàn)，方差不齊時用非參數(shù)獨(dú)立樣本Kruskal-Wallis檢驗(yàn)分析，兩組間均數(shù)比

6、較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，配對t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有顯著性。
　　結(jié)果：
　　1.行為學(xué)評估結(jié)果
　　CUS刺激前，各組大鼠的體質(zhì)量、曠場實(shí)驗(yàn)、蔗糖水消耗量的測量相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。經(jīng)過21 d的CUS應(yīng)激后;A組、C組、D組、E組大鼠與B組大鼠相比，在體質(zhì)量變化、曠場實(shí)驗(yàn)、蔗糖水消耗量的測量上差異均有顯著性(P＜0.05)。氟西汀及豐富環(huán)境干預(yù)第1周末，C組、D組、E組大鼠與B組大鼠相比部分行為明

7、顯改善，其中E組大鼠部分行為恢復(fù)較快;干預(yù)第2周末，E組大鼠與B組大鼠相比行為差異有顯著性(P＜0.05);干預(yù)第3周末;各組大鼠與B組大鼠相比行為差異均有顯著性(P＜0.05)，C組、D組、E組大鼠與A組大鼠相比行為差異均無顯著性(P＞0.05)，且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　2.大鼠海馬、前額葉、胼胝體區(qū)MBP、CNP蛋白的含量結(jié)果
　　在5組大鼠中，胼胝體區(qū)MBP、CNP蛋白的含量差異無顯著性(

8、P＞0.05)。在海馬CA1區(qū)、DG區(qū)以及前額葉區(qū)五組大鼠之間的MBP的含量差異有顯著性(F=6.956，P=0.000; F=6.098，P=0.001;F=6.590，P=0.000)，其中B組大鼠MBP的含量與其它各組相比明顯偏低，差異均有顯著性(P＜0.05)，且C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性(P＞0.05)。在海馬CA1區(qū)、DG區(qū)以及前額葉區(qū)CNP的含量差異有顯著性(F=7.277，P=0.000; F=4.93

9、7，P=0.002; F=7.431，P=0.000)。其中B組大鼠MBP的含量與其它各組相比明顯偏低，差異均有顯著性（P＜0.05），C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性(P＞0.05)，且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　3.大鼠海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBP mRNA、CNP mRNA的表達(dá)量
　　在5組大鼠中，海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBPmRNA的相對表達(dá)量差異有顯著性(F=2.872，P=0.044;

10、F=3.156，P=0.031)，其中B組大鼠與其它各組大鼠相比MBPmRNA的相對表達(dá)量均顯著降低(P＜0.05)，且C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性（P＞0.05）。海馬區(qū)、前額葉區(qū)CNPmRNA的相對表達(dá)量均存在著明顯的差異(F=4.283，P=0.009; F=2.829，P=0.046)，其中B組大鼠與其它各組相比CNPmRNA的相對表達(dá)量顯著降低，差異均有顯著性(P＜0.05)，C組、D組、E組大鼠分別與A組相比

11、差異均無顯著性（P＞0.05），且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.豐富環(huán)境和（或）氟西汀干預(yù)均可改善大鼠的抑郁樣行為，豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀在干預(yù)的早期表現(xiàn)出加快抑郁行為的改善。
　　2.CUS所致抑郁模型大鼠的海馬CA1、DG區(qū)及前額葉區(qū)MBP、CNP的蛋白含量及其轉(zhuǎn)錄水平均明顯降低，可能與抑郁癥的發(fā)病機(jī)制相關(guān)。
　　3.豐富環(huán)境和（或）氟西汀均可提高海馬CA1、DG區(qū)及前額葉區(qū)