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1、目的:本課題通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察不同光環(huán)境對(duì)幼兔眼軸長(zhǎng)度、視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)和功能,視網(wǎng)膜及血清多巴胺,以及視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞D2受體表達(dá)的影響。探討王育良教授提出的“日鐘陰陽(yáng)方”對(duì)不同光環(huán)境下對(duì)幼兔眼球發(fā)育干預(yù)作用及其作用節(jié)點(diǎn),尋找中醫(yī)藥預(yù)防近視的切入環(huán)節(jié)。
方法:1月齡健康新西蘭幼兔,雌雄兼?zhèn)?,隨機(jī)分成6組。自然光組:飼養(yǎng)在正常自然光線的照射環(huán)境中。LED燈組:飼養(yǎng)在LED燈環(huán)境。全光譜組:飼養(yǎng)在全光譜環(huán)境。自然光中藥組:飼養(yǎng)在正常自
2、然光線的照射環(huán)境,同時(shí)采用“日鐘陰陽(yáng)方”灌胃。LED燈中藥組:飼養(yǎng)在LED燈環(huán)境,同時(shí)采用“日鐘陰陽(yáng)方”灌胃。全光譜中藥組:飼養(yǎng)在全光譜環(huán)境,同時(shí)采用“日鐘陰陽(yáng)方”灌胃。遵循夏桂成陰陽(yáng)鐘調(diào)整理論的給藥方法:上午10:00給予補(bǔ)陽(yáng)方,晚上22:00給予補(bǔ)陰方。幼兔用藥劑量按成人臨床用量折算后的劑量進(jìn)行灌胃,連續(xù)12周。測(cè)定不同光源的光譜參數(shù)。在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi),取實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前、4周、8周、12周四個(gè)觀察點(diǎn)進(jìn)行體重測(cè)量、眼軸測(cè)量。4周、12周時(shí)進(jìn)行
3、血清多巴胺及視網(wǎng)膜多巴胺含量測(cè)定。第12周時(shí)取雙側(cè)眼球,分別行視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)透射電鏡觀察、多巴胺受體(D2)的免疫組化檢查。
結(jié)果:4周、8周及12周時(shí),LED燈組眼軸長(zhǎng)度顯著大于同時(shí)間自然光組、全光譜組,以及LED燈中藥組(P<0.01,P<0.05),LED燈中藥組眼軸長(zhǎng)度與自然光中藥及全光譜中藥組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6組幼兔體重發(fā)育無(wú)顯著差異。LED燈光譜主要集中在360-700nm,峰值波長(zhǎng)在450 nm、550nm附近,含
4、有紫光、藍(lán)光和光譜能量較高的中波長(zhǎng)光綠光,相對(duì)缺乏短波長(zhǎng)紫外光和長(zhǎng)波長(zhǎng)光紅光。全光譜燈光譜范圍較寬,為380 nm-760nm,峰值波長(zhǎng)約在600 nm附近,包含短波長(zhǎng)紫外光、紫光,能量較高的中波長(zhǎng)黃光和綠光和長(zhǎng)波長(zhǎng)光線紅光。光譜范圍接近自然光光譜范圍。自然光光譜范圍在380-760nm,峰值波長(zhǎng)在490nm附近。LED燈組視網(wǎng)膜組織電鏡下觀察與自然光組有明顯差別,主要體現(xiàn)在色素上皮層、光感受器和神經(jīng)纖維層。全光譜組內(nèi)可見(jiàn)脂質(zhì)顆粒位于色
5、素上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,但數(shù)量大小均不如LED燈組明顯,對(duì)細(xì)胞膜、微絨毛改變較少,光感受器內(nèi)、外節(jié)結(jié)構(gòu)較清晰,排列尚整齊,神經(jīng)纖維層存在少量空泡化現(xiàn)象,但較LED燈組程度輕。LED燈中藥組和全光譜中藥組光感受器內(nèi)、外節(jié)結(jié)構(gòu)基本清晰,排列整齊,外核層細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,染色均勻,神經(jīng)纖維層排列較為緊密,無(wú)空泡存在,但與全光譜中藥組相比,LED燈中藥組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞細(xì)胞核,形態(tài)欠規(guī)則。第4、12周時(shí),LED燈組視網(wǎng)膜及血清中多巴胺顯著低于其余5組(P<
6、0.01);自然光中藥組、LED燈中藥組、全光譜組及全光譜中藥組視網(wǎng)膜及血清中多巴胺與自然光組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第12周時(shí)LED燈組兔視網(wǎng)膜D2受體表達(dá)量顯著低于其余5組(P<0.05,P<0.01),自然光中藥組、LED燈中藥組、全光譜組,以及全光譜中藥組幼兔D2受體表達(dá)量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。LED燈中藥組幼兔視網(wǎng)膜D2受體表達(dá)上調(diào)(P<0.01)。
結(jié)論:LED燈造成屈光發(fā)育不正的原因可能是
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