不同光環(huán)境對兔視網(wǎng)膜生物鐘基因Cry1、Cry2表達的影響及中藥干預作用的研究.pdf

1、目的:本課題通過動物實驗研究，探討不同光環(huán)境對兔視網(wǎng)膜生物鐘基因Cry1、Cry2表達的影響。結合王育良教授提出的日鐘陰陽理論，觀察基于陰陽鐘理論上的中藥復方“日鐘陰陽方”對不同光環(huán)境下兔視網(wǎng)膜鐘基因Cry1、Cry2表達的干預作用。
　　方法:72只1月齡雌雄兼?zhèn)涞男挛魈m幼兔，均為清潔動物，隨機標號分為兩大組，分別為4周組和12周組。兩大組又隨機分為6組，每組6只，即自然光組、正白光LED燈組、全光譜組、自然光中藥組、正白光LE

2、D燈中藥組和全光譜中藥組。自然光組:飼養(yǎng)在正常自然光照射的環(huán)境中;正白光LED燈組:飼養(yǎng)在正白光LED燈照射的環(huán)境下;全光譜組;飼養(yǎng)在全光譜燈光環(huán)境中。各中藥組:分別飼養(yǎng)在相應的光環(huán)境中，并飼養(yǎng)的同時分別予以“日鐘陰陽方”灌胃，補陽方于每日10:00灌入，補陰方于每日22:00灌入。幼兔中藥灌胃劑量參照《藥理實驗學》中人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值進行換算，按照70kg成人體重標準，一副中藥顆粒以300ml水沖調(diào)，每日分兩次口服

3、計算，成人兔(1.59)每次服藥7ml，幼兔減半為每次3.5ml針管灌胃。自然光組、正白光LED燈組、全光譜組未予以生理鹽水灌胃，正常飼養(yǎng)。測定實驗光源的光譜參數(shù)。第4周、12周提取相應組兔視網(wǎng)膜鐘基因Cry1、Cry2。
　　結果:4周和12周后，RT-PCR基因定量檢測基因含量，正白光LED燈組兔視網(wǎng)膜Cry1 mRNA、Cry2 mRNA水平皆明顯降低(P＜0.01)，正白光LED燈中藥組兔視網(wǎng)膜Cry1mRNA、Cry2

4、mRNA含量顯著高于正白光LED燈組(P＜0.01)。而中藥對自然光組和全光譜組兔視網(wǎng)膜Cry1 mRNA、Cry2 mRNA含量無影響(P＞0.05)。免疫印跡法顯示正白光LED燈組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白水平皆明顯降低(P＜0.01)，正白光LED燈中藥組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白含量顯著高于正白光LED燈組(P＜0.01)。而中藥對自然光組和全光譜組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白含量無影響(P＞0.05)。<