不同光環(huán)境對(duì)兔視網(wǎng)膜生物鐘基因Cry1、Cry2表達(dá)的影響及中藥干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的:本課題通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，探討不同光環(huán)境對(duì)兔視網(wǎng)膜生物鐘基因Cry1、Cry2表達(dá)的影響。結(jié)合王育良教授提出的日鐘陰陽理論，觀察基于陰陽鐘理論上的中藥復(fù)方“日鐘陰陽方”對(duì)不同光環(huán)境下兔視網(wǎng)膜鐘基因Cry1、Cry2表達(dá)的干預(yù)作用。
　　方法:72只1月齡雌雄兼?zhèn)涞男挛魈m幼兔，均為清潔動(dòng)物，隨機(jī)標(biāo)號(hào)分為兩大組，分別為4周組和12周組。兩大組又隨機(jī)分為6組，每組6只，即自然光組、正白光LED燈組、全光譜組、自然光中藥組、正白光LE

2、D燈中藥組和全光譜中藥組。自然光組:飼養(yǎng)在正常自然光照射的環(huán)境中;正白光LED燈組:飼養(yǎng)在正白光LED燈照射的環(huán)境下;全光譜組;飼養(yǎng)在全光譜燈光環(huán)境中。各中藥組:分別飼養(yǎng)在相應(yīng)的光環(huán)境中，并飼養(yǎng)的同時(shí)分別予以“日鐘陰陽方”灌胃，補(bǔ)陽方于每日10:00灌入，補(bǔ)陰方于每日22:00灌入。幼兔中藥灌胃劑量參照《藥理實(shí)驗(yàn)學(xué)》中人和動(dòng)物間按體表面積折算的等效劑量比值進(jìn)行換算，按照70kg成人體重標(biāo)準(zhǔn)，一副中藥顆粒以300ml水沖調(diào)，每日分兩次口服

3、計(jì)算，成人兔(1.59)每次服藥7ml，幼兔減半為每次3.5ml針管灌胃。自然光組、正白光LED燈組、全光譜組未予以生理鹽水灌胃，正常飼養(yǎng)。測(cè)定實(shí)驗(yàn)光源的光譜參數(shù)。第4周、12周提取相應(yīng)組兔視網(wǎng)膜鐘基因Cry1、Cry2。
　　結(jié)果:4周和12周后，RT-PCR基因定量檢測(cè)基因含量，正白光LED燈組兔視網(wǎng)膜Cry1 mRNA、Cry2 mRNA水平皆明顯降低(P＜0.01)，正白光LED燈中藥組兔視網(wǎng)膜Cry1mRNA、Cry2

4、mRNA含量顯著高于正白光LED燈組(P＜0.01)。而中藥對(duì)自然光組和全光譜組兔視網(wǎng)膜Cry1 mRNA、Cry2 mRNA含量無影響(P＞0.05)。免疫印跡法顯示正白光LED燈組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白水平皆明顯降低(P＜0.01)，正白光LED燈中藥組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白含量顯著高于正白光LED燈組(P＜0.01)。而中藥對(duì)自然光組和全光譜組兔視網(wǎng)膜Cry1蛋白、Cry2蛋白含量無影響(P＞0.05)。<