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1、目的:探討五種應(yīng)激方法組成的慢性復(fù)合式應(yīng)激對(duì)雄性小鼠生育能力的影響以及六味地黃湯和加味逍遙散的干預(yù)作用。力求進(jìn)一步豐富不育癥的基礎(chǔ)研究?jī)?nèi)容。
方法:
1.100只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為正常三周組、應(yīng)激三周組、正常五周組、應(yīng)激五周組、正常七周組、應(yīng)激七周組。將心理應(yīng)激、束縛、尾懸掛、站臺(tái)、夾尾搏斗五種應(yīng)激方法隨機(jī)安排到各應(yīng)激時(shí)間內(nèi),制作慢性復(fù)合式應(yīng)激動(dòng)物模型,于末次應(yīng)激后第二天,摘眼球取血,離心取血清進(jìn)行促卵泡
2、激素(FSH)、促黃體激素(LH)、睪酮(T)檢測(cè);取睪丸、附睪稱(chēng)重,進(jìn)行精子計(jì)數(shù)、攝像(精子質(zhì)量分析)和精子內(nèi)PH值檢測(cè);并進(jìn)行睪丸切片,HE染色后觀察其病理變化。
2.60只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為正常組、應(yīng)激組、應(yīng)激加六味地黃湯組、應(yīng)激加加味逍遙散組。將心理應(yīng)激和束縛、尾懸掛、站臺(tái)、夾尾搏斗五種應(yīng)激方法隨機(jī)安排到3w內(nèi),每天一種應(yīng)激方法,相鄰兩天不重復(fù)。自應(yīng)激之日起開(kāi)始喂藥,于末此應(yīng)激后第二天,摘眼球取血,離心取血清進(jìn)
3、行促卵泡激素(FSH)、促黃體激素(LH)、睪酮(T)檢測(cè);取睪丸、附睪稱(chēng)重,進(jìn)行精子計(jì)數(shù)、攝像(精子質(zhì)量分析)和精子內(nèi)PH值檢測(cè);并進(jìn)行睪丸切片,HE染色后觀察其病理變化。
結(jié)果:五種應(yīng)激方法組成的復(fù)合式應(yīng)激方式能顯著降低動(dòng)物的體重增長(zhǎng)率、精子密度和精子活率,精子內(nèi)PH值及血清FSH、T水平有不同程度的降低。病理分析睪丸生精上皮的排列、層數(shù)、管腔精子數(shù)等也不同程度的改變。隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),小鼠的體重增長(zhǎng)率、精子內(nèi)PH值
4、等都呈上升的趨勢(shì)。六味地黃湯和加味逍遙散兩種藥物對(duì)精子大小、睪丸生精上皮的排列和凋亡評(píng)分、管腔精子量及精子內(nèi)PH值等指標(biāo)都有顯著的療效;而六味地黃湯對(duì)精子的活率、生精上皮的分化程度、生精細(xì)胞的凋亡及血清FSH水平的影響大于加味逍遙散。
結(jié)論:五種應(yīng)激方法組成的慢性復(fù)合式應(yīng)激方式能顯著改變雄性小鼠與生育有關(guān)的生理特性,降低其生育能力;隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),部分指標(biāo)可以出現(xiàn)可逆性變化。使用六味地黃湯和加味逍遙散干預(yù)后,各項(xiàng)指標(biāo)都
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