痛風(fēng)小鼠模型的建立及白藜蘆醇對(duì)其干預(yù)作用.pdf

1、研究背景與目的:
　　痛風(fēng)是嘌呤代謝紊亂和（或）尿酸排泄障礙導(dǎo)致血尿酸升高的一組疾病，以在關(guān)節(jié)滑液和其他組織中形成單鈉尿酸鹽(monosodium urate，MSU)晶體為特點(diǎn)。痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎以反復(fù)發(fā)作的急性炎癥、慢性痛風(fēng)石形成及骨侵蝕為主要臨床表現(xiàn)，高尿酸血癥是其重要的病理基礎(chǔ)。目前研究認(rèn)為痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的機(jī)制主要是MSU晶體通過識(shí)別細(xì)胞表面的Toll樣受體激活NF-κB、AP-1信號(hào)通路啟動(dòng)炎癥。MSU晶體也能夠激活NALP3炎

2、癥復(fù)合體，最終導(dǎo)致成熟的IL-1β的釋放。因此降低血尿酸濃度、抑制炎癥通路可能是預(yù)防及治療痛風(fēng)發(fā)作的有效措施。
　　近期研究發(fā)現(xiàn)，沉默調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator1，Sirt1）可能通過抑制NF-κB和AP-1的轉(zhuǎn)錄活性以及下調(diào)多種炎癥相關(guān)因子的表達(dá)來緩解炎癥。此外，Sirt1可調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝，參與調(diào)控多種代謝性疾病，研究證明Sirt1激動(dòng)劑可降低高血糖并抑制肝臟脂肪變性。白藜蘆醇(resve

3、ratrol，Res)為Sirt1的激動(dòng)劑之一，是一種多酚類天然植物抗毒素。
　　本文通過建立持續(xù)的小鼠高尿酸血癥模型及MSU誘導(dǎo)的小鼠急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，給予Sirt1激動(dòng)劑白藜蘆醇干預(yù)各模型，觀察白藜蘆醇在痛風(fēng)中的作用。
　　研究內(nèi)容與方法:
　　一、小鼠持續(xù)高尿酸血癥模型的建立及白藜蘆醇對(duì)小鼠高尿酸血癥的干預(yù)作用
　　以含25％酵母膏飼料喂食6周齡雄性昆明小鼠，聯(lián)合氧嗪酸鉀250mg/Kg腹腔注射，每天一

4、次，連續(xù)3周建立高尿酸血癥模型。治療組在建模的同時(shí)予Sirt1激動(dòng)劑白藜蘆醇20mg/Kg灌胃，每天一次，不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)內(nèi)眥靜脈采血檢測(cè)小鼠血尿酸、肌酐濃度，HE染色法檢測(cè)腎臟組織的病理改變。
　　二、白藜蘆醇對(duì)MSU誘導(dǎo)的小鼠急性關(guān)節(jié)炎的干預(yù)
　　在6-8周齡的C57BL/6雄性小鼠足掌部注射MSU誘導(dǎo)痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎模型，通過數(shù)顯卡尺測(cè)量足掌厚度評(píng)價(jià)關(guān)節(jié)腫脹程度，應(yīng)用檢測(cè)99mTc吸收率評(píng)價(jià)關(guān)節(jié)炎癥程度，于不同時(shí)間點(diǎn)給予不同劑量

5、的白藜蘆醇干預(yù)治療，評(píng)估關(guān)節(jié)炎癥變化。
　　研究結(jié)果:
　　酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀可建立持續(xù)、穩(wěn)定的高尿酸血癥模型，其中建模的第3-14d血尿酸水平顯著升高且無腎功能損害表現(xiàn)，而建模的第21d血尿酸水平上升幅度減緩，肌酐輕度上升，腎臟病理見腎小球囊壁增厚，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤，腎小管上皮細(xì)胞腫脹。干預(yù)組在誘導(dǎo)高尿酸模型同時(shí)給予白藜蘆醇治療，小鼠血尿酸水平較模型組同期明顯下降(P＜0.05)，且上述腎臟病變好轉(zhuǎn)。
　　MSU晶

6、體局部注射可誘導(dǎo)小鼠急性關(guān)節(jié)炎，炎癥表現(xiàn)程度與MSU濃度呈正比，具有一定的時(shí)間限定性，在MSU注射后8-12h小鼠足掌炎癥表現(xiàn)最顯著，24小時(shí)后炎癥逐漸減輕。給予白藜蘆醇預(yù)處理后MSU誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎癥較對(duì)照組有所緩解(P＜0.05)，白藜蘆醇分別預(yù)處理3天、7天、14天后再予MSU誘導(dǎo)炎癥發(fā)現(xiàn)預(yù)處理14天組小鼠關(guān)節(jié)炎癥最輕，且該作用與白藜蘆醇的劑量呈正相關(guān)。
　　研究結(jié)論:
　　1.酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀可建立持續(xù)、穩(wěn)定的高尿酸血