痛風小鼠模型的建立及白藜蘆醇對其干預作用.pdf

1、研究背景與目的:
　　痛風是嘌呤代謝紊亂和（或）尿酸排泄障礙導致血尿酸升高的一組疾病，以在關節(jié)滑液和其他組織中形成單鈉尿酸鹽(monosodium urate，MSU)晶體為特點。痛風性關節(jié)炎以反復發(fā)作的急性炎癥、慢性痛風石形成及骨侵蝕為主要臨床表現，高尿酸血癥是其重要的病理基礎。目前研究認為痛風性關節(jié)炎的機制主要是MSU晶體通過識別細胞表面的Toll樣受體激活NF-κB、AP-1信號通路啟動炎癥。MSU晶體也能夠激活NALP3炎

2、癥復合體，最終導致成熟的IL-1β的釋放。因此降低血尿酸濃度、抑制炎癥通路可能是預防及治療痛風發(fā)作的有效措施。
　　近期研究發(fā)現，沉默調節(jié)因子1（silent information regulator1，Sirt1）可能通過抑制NF-κB和AP-1的轉錄活性以及下調多種炎癥相關因子的表達來緩解炎癥。此外，Sirt1可調節(jié)細胞代謝，參與調控多種代謝性疾病，研究證明Sirt1激動劑可降低高血糖并抑制肝臟脂肪變性。白藜蘆醇(resve

3、ratrol，Res)為Sirt1的激動劑之一，是一種多酚類天然植物抗毒素。
　　本文通過建立持續(xù)的小鼠高尿酸血癥模型及MSU誘導的小鼠急性痛風性關節(jié)炎模型，給予Sirt1激動劑白藜蘆醇干預各模型，觀察白藜蘆醇在痛風中的作用。
　　研究內容與方法:
　　一、小鼠持續(xù)高尿酸血癥模型的建立及白藜蘆醇對小鼠高尿酸血癥的干預作用
　　以含25％酵母膏飼料喂食6周齡雄性昆明小鼠，聯(lián)合氧嗪酸鉀250mg/Kg腹腔注射，每天一

4、次，連續(xù)3周建立高尿酸血癥模型。治療組在建模的同時予Sirt1激動劑白藜蘆醇20mg/Kg灌胃，每天一次，不同時間點經內眥靜脈采血檢測小鼠血尿酸、肌酐濃度，HE染色法檢測腎臟組織的病理改變。
　　二、白藜蘆醇對MSU誘導的小鼠急性關節(jié)炎的干預
　　在6-8周齡的C57BL/6雄性小鼠足掌部注射MSU誘導痛風關節(jié)炎模型，通過數顯卡尺測量足掌厚度評價關節(jié)腫脹程度，應用檢測99mTc吸收率評價關節(jié)炎癥程度，于不同時間點給予不同劑量

5、的白藜蘆醇干預治療，評估關節(jié)炎癥變化。
　　研究結果:
　　酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀可建立持續(xù)、穩(wěn)定的高尿酸血癥模型，其中建模的第3-14d血尿酸水平顯著升高且無腎功能損害表現，而建模的第21d血尿酸水平上升幅度減緩，肌酐輕度上升，腎臟病理見腎小球囊壁增厚，腎間質炎性細胞浸潤，腎小管上皮細胞腫脹。干預組在誘導高尿酸模型同時給予白藜蘆醇治療，小鼠血尿酸水平較模型組同期明顯下降(P＜0.05)，且上述腎臟病變好轉。
　　MSU晶

6、體局部注射可誘導小鼠急性關節(jié)炎，炎癥表現程度與MSU濃度呈正比，具有一定的時間限定性，在MSU注射后8-12h小鼠足掌炎癥表現最顯著，24小時后炎癥逐漸減輕。給予白藜蘆醇預處理后MSU誘導的關節(jié)炎癥較對照組有所緩解(P＜0.05)，白藜蘆醇分別預處理3天、7天、14天后再予MSU誘導炎癥發(fā)現預處理14天組小鼠關節(jié)炎癥最輕，且該作用與白藜蘆醇的劑量呈正相關。
　　研究結論:
　　1.酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀可建立持續(xù)、穩(wěn)定的高尿酸血