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文檔簡介
1、目的:
1.研究術(shù)后疲勞綜合征(Postoperative Fatigue Syndrome,POFS)大鼠海馬內(nèi)炎癥因子、經(jīng)典炎癥通路、吲哚胺2,3加氧合酶(Indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)及神經(jīng)遞質(zhì)變化。
2.觀察在應(yīng)用人參皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1)干預(yù)后炎癥通路及神經(jīng)遞質(zhì)變化規(guī)律,探討人參皂苷Rb1的抗中樞疲勞機(jī)制。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF
2、級SD雄性青年大鼠,體重(200-250g),購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。
2.方法及檢測指標(biāo)將96只SD大鼠隨機(jī)分為對照組、POFS模型組(POFS組)和人參Rb1干預(yù)組(人參Rb1組),每組再按時(shí)間點(diǎn)分為術(shù)后1、3、5、7天4小組。術(shù)后對應(yīng)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行曠場試驗(yàn),Real-timePCR檢測大鼠海馬炎癥因子的mRNA表達(dá);Western blot檢測磷酸化p-p38MAPK、NF-κB/p65、IDO的蛋白表達(dá);免疫組化法
3、檢測海馬內(nèi)p-p38MAPK、IDO蛋白表達(dá);免疫熒光法檢測海馬內(nèi)NF-κB/p65蛋白核內(nèi)外分布。高效液相法檢測海馬內(nèi)五-羥色胺(5-Serotonin,5-HT)、色氨酸(Tryptophan,TRP)、犬尿氨酸(Kynurenine,KYN)等氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)的變化。
結(jié)果:
1.曠場試驗(yàn):與對照組比較,術(shù)后1、3天POFS組大鼠運(yùn)動(dòng)距離減少(p<0.01),休息時(shí)間增加(p<0.01);人參Rb1組與POFS組
4、比較,術(shù)后1、5天,大鼠休息時(shí)間明顯縮短(p<0.05);術(shù)后1、3天,大鼠運(yùn)動(dòng)距離增加(p<0.01)。
2.Real-time PCR:與對照組比較,術(shù)后1、3天,大鼠海馬內(nèi)各項(xiàng)炎癥因子mRNA表達(dá)均升高(p<0.05);人參Rb1組與POFS組比較,術(shù)后1、3天,中樞內(nèi)各項(xiàng)炎癥因子mRNA表達(dá)均下降(p<0.05)。
3.Western Bolt、免疫組化、免疫熒光結(jié)果:與對照組比較,術(shù)后1、3天, p-p38
5、MAPK、IDO蛋白表達(dá)增加(p<0.05),NF-κB/p65胞核/NF-κB/p65胞漿增加(p<0.05);人參Rb1組與POFS組比較,術(shù)后1、3天,IDO蛋白表達(dá)、NF-κB/p65胞核/NF-κB/p65胞漿明顯減少(p<0.05);術(shù)后3、5、7天p-p38MAPK蛋白表達(dá)降低(p<0.05)。免疫組化、免疫熒光結(jié)果與western-blot相同。
4.高效液相結(jié)果:與對照組相比,術(shù)后1,3天,海馬內(nèi)TRP、KY
6、N水平明顯升高(p<0.05),術(shù)后第1天,5-HT水平明顯下降(p<0.05)。人參Rb1組與POFS組相比,術(shù)后第1天,海馬內(nèi)TRP、KYN水平明顯下降(p<0.05),5-HT水平明顯上升(p<0.05)。
結(jié)論:
1.POFS大鼠海馬內(nèi)炎癥因子升高,炎癥因子/MAPK/NF-κB/IDO通路激活,改變了海馬內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的平衡。從而導(dǎo)致中樞疲勞的產(chǎn)生。
2.人參皂苷Rb1能通過抗炎作用調(diào)節(jié)中樞內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)
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