1,3-甘油二酯乳脂對(duì)SD大鼠脂肪代謝的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、本文通過酶法甘油解對(duì)普通乳脂進(jìn)行改性,制備1,3-甘油二酯(1,3-DG)乳脂,并通過SD大鼠飼養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,探討1,3-DG具有降脂減肥功效及其機(jī)制,同時(shí)建立了SD大鼠脂肪代謝相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量的檢測(cè)方法。
　　1、PCR檢測(cè)方法的建立
　　建立運(yùn)用SYBR Green I嵌合熒光染料定量檢測(cè)SD大鼠脂肪代謝相關(guān)酶的mRNA的相對(duì)定量PCR檢測(cè)方法,針對(duì)SD大鼠脂肪代謝中的乙酰輔酶A羧化酶(ACC),脂肪酸合成酶(FAS

2、),激素敏感酯酶(HSL),肉堿棕櫚酸轉(zhuǎn)移酶-I(CPT-I)及管家基因β-actin的序列設(shè)計(jì)了特異性的引物,建立SYBR Green I嵌合熒光法相對(duì)定量PCR檢測(cè)方法。此方法無非特異性產(chǎn)物的產(chǎn)生;檢測(cè)下限均達(dá)10-6,;批內(nèi)及批間變異系數(shù)均小于2.8％,具有特異性強(qiáng)、敏感性高、重復(fù)性好等特征.可用于SD大鼠肝臟脂類代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè)。
　　2、甘油酯改性乳脂的制備
　　選用固定化脂肪酶Lipozyme

3、 RMIM(EC3.1.1.3),全酶法甘油解無溶劑體系中的乳脂,制備含有1,3-DG的甘油酯改性乳脂。反應(yīng)時(shí)間為16.51h,酶添加量為6.41%,反應(yīng)溫度為51.08℃,水分添加量為4.35%,甘油和乳脂摩爾比為1.33。此時(shí)得到的反應(yīng)產(chǎn)物中1,3-DG的含量為30.21%。
　　3、SD大鼠飼養(yǎng)試驗(yàn)
　　60只SD大鼠隨機(jī)分為基礎(chǔ)對(duì)照組、低劑量改性乳脂組、中劑量改性乳脂組、高劑量改性乳脂組、普通乳脂組,8周的飼養(yǎng)試驗(yàn)后

4、測(cè)定體重、血液生化指標(biāo)及相關(guān)基因相對(duì)表達(dá)量,結(jié)果表明:
　　(1)用1,3-DG替代乳脂中的TG具有降低體重、血脂、血糖平均水平的功效,且會(huì)使得血液游離脂肪酸增加。
　　(2)不具有調(diào)節(jié)總膽固醇代謝的功效,但其中HDL-C含量上升,LDL-C含量下降。
　　(3)1,3-DG比TG可顯著降低肝臟FAS、ACC的表達(dá),使得脂肪酸的從頭合成減弱,減少脂肪積累;同時(shí),1,3-DG比TG可顯著增加CPT-I的表達(dá)量,從而促進(jìn)脂