辛酸甘油二酯酶法合成及其純化工藝的研究.pdf

1、甘油二酯已廣泛應(yīng)用于食品、化妝品和藥品等工業(yè)領(lǐng)域。近年還發(fā)現(xiàn)，甘油二酯具有降低人體血脂，減少內(nèi)臟脂肪、抑制體重增加等作用。但甘油二酯在天然油脂中含量較低，因此，甘油二酯的合成技術(shù)日益受到國內(nèi)外廣泛關(guān)注。目前，甘油二酯的合成方法主要有化學(xué)法和酶法。相較化學(xué)催化劑，酶作為生物催化劑，具有反應(yīng)條件溫和、能耗低、環(huán)境污染小，以及良好的區(qū)域和位置選擇性等優(yōu)點(diǎn)，且酶法合成甘油二酯過程的副產(chǎn)物少，甘油二酯的純度高、色澤好。因此，酶法制備甘油二酯已成為

2、食品和藥品等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。本論文針對無溶劑體系中脂肪酶催化辛酸和甘油制備甘油二酯及其純化工藝進(jìn)行了系統(tǒng)研究。主要內(nèi)容如下：
　　 1．從三種來源和固定化方式不同的脂肪酶Novozyme 435、Lipozyme RM IM和Lipozyme TL IM中篩選出Novozyme 435為最佳酶催化劑。
　　 2.以Novozyme 435為催化劑，研究了無溶劑體系下辛酸和甘油直接酯化合成甘油二酯的工藝參數(shù)。單因素實(shí)驗(yàn)

3、考察了不同脫水方式、底物摩爾比、反應(yīng)溫度、加酶量、反應(yīng)時間、初始加水量等因素對辛酸轉(zhuǎn)化率和甘油二酯含量的影響。在此基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)面法優(yōu)化了工藝參數(shù)，建立了產(chǎn)物中辛酸甘油二酯含量的回歸模型方程，獲得的最優(yōu)工藝條件：底物摩爾比1.99:1，反應(yīng)溫度51.5oC，加酶量3.05％，反應(yīng)時間6.29 h。在此最優(yōu)條件下，實(shí)測甘油二酯的含量可達(dá)71.9％，與模型預(yù)測的含量71.3±0.88％非常吻合，證明該模型是合理可靠的。
　　 3．

4、應(yīng)用硅膠柱層析分離純化辛酸甘油二酯的工藝技術(shù)研究。通過硅膠板薄層層析從六種洗脫劑（氯仿-乙酸已酯、氯仿-甲醇、正己烷-乙酸、石油醚-異丙醇、石油醚-正丁醇、石油醚-無水乙醚）中初步篩選出石油醚-無水乙醚體系為最佳流動相。
　　 在石油醚-無水乙醚洗脫體系中，考察了石油醚-無水乙醚的溶液配比、流速、上樣量對洗脫效果的影響。結(jié)果表明，當(dāng)上樣量為4 g，流速2.5ml/min，用4.5:1、0.5:1（v/v）石油醚-無水乙醚溶液進(jìn)行