溫敏性細(xì)胞培養(yǎng)基底的制備及其對平滑肌細(xì)胞和肝癌細(xì)胞的生長與粘附行為的影響.pdf

1、器官移植長期以來受到捐獻(xiàn)數(shù)量不足以及移植排斥的影響，組織工程作為再生醫(yī)學(xué)的重要工具，目的就是為了解決器官移植的不足。然而傳統(tǒng)組織工程使用生物可降解材料或注射細(xì)胞懸液的方法也有諸多不足，生物可降解支架的生物相容性需要驗(yàn)證，某些生物支架會造成植入部位附近組織發(fā)炎增生，生物可降解支架的降解也會引起炎癥反應(yīng)。其次，支架降解會留下一定空間，而這些空間通常會被增殖的細(xì)胞以及大量的胞外基質(zhì)填滿，但是過多的胞外基質(zhì)以及支架降解殘留物又會造成組織纖維化，

2、從而產(chǎn)生病變。因此，研究者們創(chuàng)造出新的組織工程的方法來制備組織，即使用溫敏性高分子材料制備溫敏性細(xì)胞培養(yǎng)基底，并以此制備細(xì)胞片應(yīng)用于組織工程中。
　　 本文首先探討氣道平滑肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)與鑒定，接著通過使用聚異丙基丙烯酰胺以普通細(xì)胞培養(yǎng)皿為基礎(chǔ)制備溫敏性細(xì)胞培養(yǎng)基底，并在其上培養(yǎng)氣道平滑肌細(xì)胞，以觀察溫敏性培養(yǎng)基底對氣道平滑肌細(xì)胞生長的影響以及其調(diào)控細(xì)胞的黏附行為，并通過溫敏性培養(yǎng)基底制備氣道平滑肌細(xì)胞片。主要目的是掌握大鼠氣

3、道平滑肌的原代培養(yǎng)和鑒定以及溫敏性細(xì)胞培養(yǎng)皿的制備工藝，并為將來更深層次的研究打下基礎(chǔ)。
　　 本文主要實(shí)驗(yàn)結(jié)論如下：
　　 ①使用水和異丙醇作為溶劑制備異丙基丙酰胺溶液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以水作為溶劑的異丙基丙酰胺溶液經(jīng)照射后無法達(dá)到溫敏性培養(yǎng)基底的標(biāo)準(zhǔn)，原因是異丙基丙烯酰胺在水里的溶解度過低，通過聚合無法使異丙基丙烯酰胺與普通培養(yǎng)皿表面形成良好的共價(jià)連結(jié)。
　　 ②利用西南醫(yī)院輻照中心γ射線以及四川原子能研究院電子加速

4、器對涂覆有異丙基丙烯酰胺單體的普通細(xì)胞培養(yǎng)皿進(jìn)行輻照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使用γ射線輻照能夠制備聚異丙基丙烯酰胺水凝膠，但無法制備溫敏性培養(yǎng)基底。原因是γ射線輻照所需時(shí)間過長，導(dǎo)致溶劑異丙醇溶劑已揮發(fā)完全。相反，電子加速器輻照則很好地解決了這個(gè)問題。
　　 ③以異丙醇為溶劑配制不同質(zhì)量濃度比例40％，45％，50％，55％的異丙基丙酰胺溶液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)45％質(zhì)量濃度下制備的溫敏性培養(yǎng)基底細(xì)胞黏附性最佳。另外，200μL 為制備溫敏性培養(yǎng)基底