藥物抑制非肌肉肌球蛋白Ⅱ?qū)π∈竽遗甙l(fā)育的影響.pdf

1、非肌肉肌球蛋白Ⅱ是一類不存在于肌肉細(xì)胞中的肌球蛋白，肌球蛋白不只是存在于肌肉細(xì)胞中，存在于非肌肉細(xì)胞中的肌球蛋白稱為非肌肉肌球蛋白，肌球蛋白與非肌肉肌球蛋白在結(jié)構(gòu)上相似但不相同。在功能上，肌球蛋白存在于肌肉細(xì)胞中，主要是在肌肉運(yùn)動(dòng)的過(guò)程中起重要作用。非肌肉肌球蛋白存在于非肌肉細(xì)胞中，參與細(xì)胞的多種生理活動(dòng)，與細(xì)胞遷移、細(xì)胞粘附、細(xì)胞分裂、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分泌、細(xì)胞修復(fù)、病毒入侵、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、器官發(fā)育、干細(xì)胞都有著密切的關(guān)系。非肌肉肌球蛋白Ⅱ

2、現(xiàn)如今是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，但大多非肌肉肌球蛋白Ⅱ的研究實(shí)驗(yàn)都是在細(xì)胞水平進(jìn)行的，很少的實(shí)驗(yàn)涉及到哺乳動(dòng)物胚胎層面。本實(shí)驗(yàn)在小鼠胚胎早期發(fā)育過(guò)程中初步研究了抑制非肌肉肌球蛋白Ⅱ?qū)π∈竽遗甙l(fā)育的影響，為進(jìn)一步研究小鼠胚胎早期發(fā)育過(guò)程中非肌肉肌球蛋白Ⅱ的功能提供了具有參考意義的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　目的：探討抑制非肌肉肌球蛋白Ⅱ（non-muscle myosinⅡ,NMⅡ）對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠早期胚胎發(fā)育過(guò)程中囊胚形成以及干性相關(guān)基因表達(dá)的影響

3、。
　　方法：從懷孕2.5天（E2.5）的孕鼠體內(nèi)分離子宮取胚，將此時(shí)收集到的桑椹胚（morula）隨機(jī)分為對(duì)照組與25μM(-)-Blebbistatin藥物處理過(guò)的實(shí)驗(yàn)組，分別在體外培養(yǎng)24h后，囊胚的發(fā)育情況用體視顯微鏡觀察，并且運(yùn)用免疫熒光標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)干性相關(guān)基因nanog，oct4，sox2，ssea1，estrogen的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：(-)-Blebbistatin處理后的桑椹胚無(wú)法繼續(xù)發(fā)育形成囊胚腔（b