肌球蛋白重鏈基因MyHC與中國(guó)地方雞肌肉品質(zhì)之間的相關(guān)研究.pdf

1、清遠(yuǎn)麻雞以其體型小、皮下和肌間脂肪發(fā)達(dá)、皮薄骨軟而著名，現(xiàn)在已經(jīng)成為我國(guó)活雞出口的小型肉用名產(chǎn)雞之一；魯兩斗雞屬玩賞型，但是體型高達(dá)魁梧，體質(zhì)健壯，體軀長(zhǎng)，類似鴕鳥身，尤其是胸腿肌發(fā)達(dá)，具有良好的胸肌腿肌產(chǎn)量，在我國(guó)地方肉雞生產(chǎn)中常被用作雜交父本。本研究選用魯西斗雞和清遠(yuǎn)麻雞作為主要的實(shí)驗(yàn)材料，對(duì)其進(jìn)行了骨骼肌細(xì)胞類型分析，以及生長(zhǎng)和肉質(zhì)測(cè)定，并檢測(cè)了相關(guān)基因的表達(dá)情況。 實(shí)驗(yàn)以處于生長(zhǎng)曲線拐點(diǎn)處的10只青年魯西斗雞和15只青年

2、清遠(yuǎn)麻雞為研究對(duì)象，采集了體重、脛骨長(zhǎng)數(shù)據(jù)和胸淺肌、腓腸肌的肌肉樣品。在個(gè)體水平，測(cè)定了胸淺肌、腓腸肌的pH值、失水率、剪切力；在組織水平，對(duì)胸淺肌腓腸肌分別冰凍切片，SDH染色結(jié)合Image Pro-plus軟件鑒定分析組織中的紅肌纖維、中間型纖維、白肌纖維及獲得其參數(shù)；在分子角度，提取總RNA，以GAPDH為對(duì)照，通過(guò)RT-PCR定性地鑒定SMl、M2、U、IMFH的表達(dá)，利用Real-TimePCR對(duì)不同品種不同組織中四個(gè)基因的表

3、達(dá)進(jìn)行了量化測(cè)定。 SDH染色后統(tǒng)計(jì)分析，魯西斗雞胸淺肌中的中間型纖維和紅肌纖維表現(xiàn)出了相同的變化趨勢(shì)，肌纖維密度和數(shù)量比例均低于清遠(yuǎn)麻雞的，但是肌纖維直徑大于清遠(yuǎn)麻雞直徑。為了更進(jìn)一步分析不同組織類型對(duì)肌纖維參數(shù)的影響，將肌肉組織分為了含有紅肌型、中間型、白肌型的RMW型，含有中間型和白肌型纖維的MW型以及僅含白肌纖維的W型。魯西斗雞胸淺肌中含有33％的RMW型肌肉組織，清遠(yuǎn)麻雞中還有5.3％的RMW型胸淺肌，這與胸淺肌中較高

4、比例紅肌纖維有關(guān)，RMW型的魯西斗雞胸淺肌的剪切力要小于相同類型胸淺肌的清遠(yuǎn)麻雞。性別效應(yīng)不顯著。肉質(zhì)品質(zhì)顯示，清遠(yuǎn)麻雞胸淺肌的肉質(zhì)嫩度與魯西斗雞的胸淺肌的肉質(zhì)嫩度差異不顯著。慢縮型肌球蛋白SMl、慢縮型肌球蛋白SM2、快縮型U、肌內(nèi)脂肪基因IMFH四個(gè)基因用于評(píng)定不同品種不同組織不同組織類型間的基因表達(dá)差異。定量PCR數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，在不同組織類型中，RMW的含量越多，紅肌纖維數(shù)量越多，SM2的表達(dá)量越高；SM1與SM2的表達(dá)具有相同的

5、趨勢(shì)，但是表達(dá)量要比后者低一些，SMl的表達(dá)量與紅肌纖維的直徑顯著正相關(guān)，即紅肌纖維的直徑越大，SMl的表達(dá)量越高?；騏的表達(dá)量極低，與肉質(zhì)幾乎無(wú)相關(guān)性，所以不予考慮。肌內(nèi)脂肪基因IMFH在胸淺肌和腓腸肌中的表達(dá)趨勢(shì)與SM2的表達(dá)趨勢(shì)相似，且與SM2極顯著相關(guān)(P<0.01)。這也從側(cè)面說(shuō)明了紅肌纖維數(shù)量越多肉質(zhì)越嫩的另一個(gè)原因，肌內(nèi)脂肪含量較高。 改進(jìn)后的SDH染色借助灰度值范圍，可有效鑒別三種纖維類型，紅肌纖維在品種間存在