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文檔簡介
1、本文從牛骨骼肌中提取肌球蛋白質(zhì)并進(jìn)行純化以后,分別進(jìn)行了不同程度的壓力(100、200、300、400 MPa)處理。通過SDS—PAGE檢測得到肌球蛋白的純度,以及受壓程度。并對(duì)高壓處理后肌球蛋白質(zhì)的溶解性、ATP酶活性、芳香族疏水性、光散射性質(zhì)、質(zhì)量中心以及肌球蛋白質(zhì)巰基(SH)含量的變化進(jìn)行了研究。通過SDS—PAGE電泳圖得出,隨著壓力的升高肌球蛋白質(zhì)條帶逐漸變淡變細(xì),在400 MPa的壓力條件下,分子量約為13.8 KDa的肌
2、球蛋白質(zhì)輕鏈幾乎消失。這可能與超高壓處理后蛋白質(zhì)降解成小分子量的蛋白質(zhì)或多肽,氨基酸等有關(guān)。肌球蛋白質(zhì)的溶解度隨著壓力的升高逐漸下降。處理壓力在100~200 MPa之間,溶解度下降較顯著。肌球蛋白質(zhì)的ATP酶活性隨著壓力和KCL濃度的增高普遍下降。隨著壓力的逐漸升高芳香族疏水性殘基含量逐漸增加,當(dāng)壓力高于300 MPa時(shí)芳香族疏水性殘基含量反而有下降的趨勢,但不是很顯著。肌球蛋白質(zhì)中酪氨酸、色氨酸的熒光強(qiáng)度隨著壓力的升高逐漸降低。隨著
3、壓力的升高,肌球蛋白質(zhì)的光散射強(qiáng)度逐漸下降,當(dāng)壓力達(dá)到400 MPa時(shí)肌球蛋白質(zhì)的光散射強(qiáng)度僅為未受壓力時(shí)的57%。肌球蛋白質(zhì)的質(zhì)量中心值隨著壓力的升高也逐漸下降,當(dāng)壓力高于300 MPa時(shí)質(zhì)量中心值突然下降,到400 MPa時(shí)達(dá)到最低值275/105cm-1。隨著壓力的增加肌球蛋白質(zhì)巰基(SH)吸光度逐步下降。300~400 MPa之間肌球蛋白質(zhì)巰基吸光度下降的比較顯著,到400 MPa時(shí)巰基吸光度達(dá)到最低值0.178A。因此本次實(shí)驗(yàn)
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