維甲酸對(duì)魚(yú)鱗病RARγ、RXRα和角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、背景：
　　魚(yú)鱗病是一種角化異常性遺傳性疾病，其特征是過(guò)度角化和鱗屑。目前，魚(yú)鱗病最主要的治療藥物為維甲酸。維甲酸類藥物經(jīng)消化吸收后與維甲酸受體相結(jié)合，進(jìn)而激活維甲酸信號(hào)通路而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)。維甲酸受體包括兩類子受體家族即RARs和RXRs，RARs和RXRs分別有3種亞型（α、β、γ），皮膚中主要表達(dá)的是RARγ和RXRα。
　　在臨床實(shí)踐中，維甲酸類藥物治療魚(yú)鱗病存在個(gè)體療效上的差異，一部分患者對(duì)維甲酸類藥物高度敏感，小

2、劑量的藥物治療就能取得顯著的臨床療效，而有一部分患者對(duì)維甲酸類藥物反應(yīng)差，大劑量的藥物治療其療效仍不滿意。那么這種個(gè)體療效上的差異，是否源于個(gè)體維甲酸受體的差異呢？目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)相關(guān)報(bào)道，本課題就此進(jìn)行了探索。
　　皮膚角質(zhì)層屏障結(jié)構(gòu)之一的角化細(xì)胞被膜由蛋白包膜和脂質(zhì)包膜兩部分構(gòu)成，包括角蛋白、絲聚合蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白、兜甲蛋白。這種結(jié)構(gòu)十分穩(wěn)定，可以抵抗蛋白酶的水解作用，是皮膚屏障功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　目前

3、，我們課題組在魚(yú)鱗病領(lǐng)域進(jìn)行了大量的研究?，F(xiàn)已運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)SP法和Western﹣blot法檢測(cè)RNA干擾（RNAi）技術(shù)沉默TGM1基因表達(dá)前、后角質(zhì)形成細(xì)胞分化標(biāo)志物K10、內(nèi)披蛋白、絲聚合蛋白及角質(zhì)包膜形成相關(guān)的兜甲蛋白和SPRRs的表達(dá)差異。結(jié)果顯示：TGM1沉默后細(xì)胞K10、兜甲蛋白、SPRRs表達(dá)下降，而內(nèi)披蛋白和絲聚合蛋白無(wú)明顯改變。為進(jìn)一步深入研究，本課題擬初步探索3-5例魚(yú)鱗病患者皮膚中角質(zhì)化包膜相關(guān)蛋白的表達(dá)情況

4、，及維甲酸用藥前后維甲酸受體、角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白的表達(dá)情況，以指導(dǎo)后期的細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
　　目的：
　　1、觀察魚(yú)鱗病患者接受維甲酸治療前后其皮膚中維甲酸受體（RARγ和RXRα）表達(dá)是否存在差異，如存在差異，這種差異與療效之間的關(guān)系。
　　2、觀察魚(yú)鱗病患者皮膚中角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白（角蛋白10、絲聚合蛋白、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白）表達(dá)與正常人群之間是否存在差異，及魚(yú)鱗病患者接受維甲酸治療前后其皮膚中角質(zhì)

5、包膜相關(guān)蛋白表達(dá)是否存在差異。
　　方法：
　　本研究收集3例魚(yú)鱗病患者，予以阿維A膠囊治療，使用劑量為0.6﹣0.7mg/kg·d，在用藥前和用藥8周后分別在患者的皮損處和非皮損出取材，運(yùn)用免疫組化法和Western﹣blot來(lái)檢測(cè)皮膚中維甲酸受體RARγ和RXRα的表達(dá)，運(yùn)用免疫組化法檢測(cè)皮膚中的角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白）的表達(dá)，同時(shí)選取3例正常人群作對(duì)照。最后運(yùn)用SPSS19.0軟件

6、進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　　1、根據(jù)維甲酸治療魚(yú)鱗病的療效，分為療效顯著者和療效一般者。對(duì)于療效顯著者，其皮膚中（皮損及非皮損處）維甲酸受體RARγ、RXRα的表達(dá)量增多、染色強(qiáng)度增加，即維甲酸受體RARγ、RXRα的蛋白表達(dá)量升高，推測(cè)對(duì)于療效顯著者，維甲酸可能上調(diào)皮膚中RARγ、RXRα的表達(dá)。對(duì)于療效一般者，其皮膚中（皮損及非皮損處）維甲酸受體RARγ、RXRα的表達(dá)量減少、染色強(qiáng)度減弱，即維甲酸受體RARγ、RX

7、Rα的蛋白表達(dá)量下降，推測(cè)對(duì)于療效一般者，維甲酸可能下調(diào)皮膚中RARγ、RXRα的表達(dá)。
　　2、正常人群皮膚中角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白）的表達(dá)可能高于魚(yú)鱗病患者（用藥前后皮損及非皮損處）。在維甲酸治療后，其皮膚中（皮損及非皮損處）絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋白、內(nèi)披蛋白、富含脯氨酸的小蛋白等的表達(dá)減少、染色強(qiáng)度減弱，推測(cè)維甲酸可能下調(diào)角質(zhì)包膜相關(guān)蛋白（絲聚合蛋白、角蛋白10、兜甲蛋