蜂毒素對(duì)沉默組織蛋白酶S的MHCC97-H裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)的影響.pdf

1、目的：在各種組織蛋白酶S(CTSS)的研究中發(fā)現(xiàn)，組織蛋白酶S在眾多惡性腫瘤（如肝癌、胃癌、膀胱癌等）中的表達(dá)量增高，而且參與腫瘤新生血管生成，增加腫瘤侵襲性、轉(zhuǎn)移能力，是腫瘤發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移的因素之一；在研究中發(fā)現(xiàn)蜂毒素具有抗腫瘤特性，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)具有抑制作用，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用蜂毒素干預(yù)沉默CTSS的MHCC97-H細(xì)胞株后，探究沉默CTSS以及蜂毒素對(duì)細(xì)胞株生長(zhǎng)狀況的影響；通過(guò)建立沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠腫

2、瘤模型，使用蜂毒素干預(yù)，探討CTSS和蜂毒素在生物體內(nèi)是否具有相同的作用。
　　方法：通過(guò)制備的沉默CTSS的MHCC97-H細(xì)胞株（沉默CTSS的細(xì)胞株用PLVT1150表示，正常表CTSS的細(xì)胞株用PLVT8表示），使用不同濃度蜂毒素干預(yù)細(xì)胞株，利用流式細(xì)胞儀評(píng)價(jià)沉默CTSS后對(duì)蜂毒素敏感性變化的情況，及蜂毒素對(duì)MHCC97-H細(xì)胞株凋亡的影響。并制作沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠皮下荷瘤模型，使用蜂毒素干預(yù)，觀察裸鼠移植

3、腫瘤生長(zhǎng)的狀況，探討沉默CTSS和蜂毒素在機(jī)體內(nèi)的作用機(jī)制。使用免疫組化檢測(cè)caspase3，cleved-caspase3在裸鼠荷瘤模型中的表達(dá)情況，探究蜂毒素和沉默CTSS引起腫瘤細(xì)胞凋亡的途徑。
　　結(jié)果：通過(guò)使用不同濃度蜂毒素（0ug/ml、4ug/m、8ug/ml）分別處理PLVT1150細(xì)胞株及PLVT8細(xì)胞株30分鐘后，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組凋亡率，該試驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果取均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示，其中PLVT1150細(xì)胞凋

4、亡率依次為18.87％、36.72%、52.98%,PLVT8凋亡率依次為4.27%、15.32%、28.86%。在沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠腫瘤模型中,蜂毒素協(xié)同CTSS沉默可顯著抑制動(dòng)物模型腫瘤的生長(zhǎng),表明蜂毒素可能擁有促進(jìn)MHCC97-H細(xì)胞凋亡的作用。在裸鼠腫瘤組織切片的免疫組化實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到蜂毒素干預(yù)組caspase-3表達(dá)量較對(duì)照組減少，而cleaved-caspase-3表達(dá)量則增多。在蜂毒素干預(yù)沉默CTSS后的MH