腫瘤標志物的可視化檢測.pdf

1、腫瘤標志物（Tumor Marker）是出現(xiàn)在血液和組織中與腫瘤有關的分子，其檢測對腫瘤患者的診斷有重要意義。因此，發(fā)展一種早期靈敏檢測腫瘤標志物的方法對臨床研究和治療至關重要。近年來，基于納米材料類過氧化物酶活性的比色生物傳感由于成本低、易于制備和實用等優(yōu)點而受到研究者越來越多的關注，比色生物傳感的關鍵是將檢測這一事件轉化為顏色的變化并且肉眼可識別。與生物酶相比，人工模擬酶具有穩(wěn)定的催化活性，耐酸堿和溫度能力強，對蛋白質(zhì)變性不敏感和生

2、產(chǎn)成本低等優(yōu)點。在人工模擬酶中，特別是無機納米材料模擬生物酶由于其獨特的大小、形狀、低毒性和高生物相容性等優(yōu)點而被廣泛應用于比色生物傳感。
　　本論文主要以制備的具有類過氧化物酶活性的納米粒子 Pd-Cu納米粒子和NH2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物為類過氧化物酶敏感材料，采用比色技術，分別建立了檢測癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）的比色生物傳感新方法。在過氧化氫存在的條件下，具有類過氧化物酶活性的Pd-Cu納米粒子和N

3、H2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物可以催化辣根過氧化物酶的底物3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）產(chǎn)生顏色反應，并且與辣根過氧化物酶相似，Pd-Cu納米粒子和 NH2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物的催化活性依賴于pH、溫度和過氧化氫濃度。具體研究內(nèi)容如下：
　　(1)癌胚抗原（CEA）是結腸癌的一種特異性標志物并被廣泛接受作為結腸癌診斷附屬物。因此，探索一種簡單、廉價、快速、靈敏檢測血清中 CEA的檢測方法，對結腸癌

4、患者的的臨床診斷有重要意義。本文根據(jù)自己探索的方法合成了介孔狀的Pd-Cu納米粒子，并用透射電鏡（TEM）、X射線衍射譜（XRD）和能量散射X-射線圖譜（EDS）進行表征。類過氧化物酶活性研究發(fā)現(xiàn)，制備的Pd-Cu納米粒子可以催化H2O2氧化TMB發(fā)生顯色反應，其對H2O2和TMB的米氏常數(shù)分別為427 mM和0.173 mM，表現(xiàn)出較高親和力，對 H2O2和 TMB的催化常數(shù)分別高于 HRP，其中對于 TMB的催化常數(shù)是HRP的4.7

5、倍，表明Pd-Cu納米粒子具有較高的催化活性。Pd-Cu納米粒子進一步負載癌胚抗原抗體，以TMB為顯色探針，建立了檢測CEA的比色生物傳感新方法。在優(yōu)化條件下，線性范圍是0.0005~10.00 ng/mL,最低檢測限是0.10 pg/mL。此方法操作簡單、穩(wěn)定性好、靈敏度高，結果令人滿意。
　　(2)甲胎蛋白（AFP）是在卵黃囊中產(chǎn)生的血漿蛋白，是在臨床診斷中眾所周知的腫瘤標志物。AFP在成人血漿中濃度的上升可以被認為是肝細胞癌

6、或上皮性卵巢腫瘤的標志物。因此，發(fā)展一種準確而靈敏的檢測 AFP的方法對于臨床研究至關重要。在這篇文章里，我們通過新型的理化方法合成了有一定大小和形狀的 Pt-Pd-Ru納米枝晶（Nanodendrites）并通過透射電鏡進行表征，由于Pt-Pd-Ru納米粒子在水溶液中的分散性差，我們將其負載到氨基化石墨烯上（NH2-GS），得到NH2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物，制備的這種 NH2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物具有類似于過氧

7、化物酶的高催化活性，我們把這種納米材料應用在比色生物傳感中，用于檢測腫瘤標志物甲胎蛋白。類過氧化物酶活性研究發(fā)現(xiàn)，制備的NH2-GS@Pt-Pd-Ru納米復合物可以催化H2O2氧化TMB發(fā)生顯色反應，其對H2O2和TMB的米氏常數(shù)分別為267 mM和0.136 mM，表現(xiàn)出較高親和力，對H2O2和TMB的催化常數(shù)分別高于HRP，其中對于TMB的催化常數(shù)是HRP的2.2倍，表明NH2-GS-Pt-Pd-Ru納米粒子具有較高的催化活性。由于