補腎活血固齒方對牙周炎大鼠牙周膜OPG、RANKL影響的實驗研究.pdf

1、目的：采用牙周結(jié)扎聯(lián)合喂食黏軟食物和高糖水的方法建立大鼠牙周炎模型，灌胃牙周炎大鼠補腎活血固齒方4周，取牙體牙周局部標本，制作組織切片，切片分別行HE和免疫組織化學染色，觀察牙周組織病理形態(tài)學改變及對牙周膜 OPG、RANKL水平的影響，探討補腎活血固齒方治療牙周炎的作用機制。
　　方法：采用隨機分組方法將24只雄性SD大鼠分為3組：對照組、牙周炎組、牙周炎用藥組。腹腔注射0.3％戊巴比妥鈉（1ml/100g）麻醉下，剝離牙齦，直

2、徑0.2 mm的正畸不銹鋼結(jié)扎絲對大鼠同側(cè)上頜第一磨牙進行結(jié)扎，于術(shù)后當天喂食用鼠料浸泡而成的黏軟食物和高糖水，建立牙周炎組和牙周炎用藥組大鼠模型；對照組只施以同樣的腹腔麻醉，不做牙周處理，于術(shù)后當天喂食常規(guī)鼠料和水。牙周炎造模4周后，3組隨機各抽取2只大鼠，取第一磨牙牙體牙周組織標本，制作切片，行HE染色，鑒定大鼠牙周炎造模是否成功。確定造模成功后，將牙周炎組、牙周炎用藥組各6只大鼠腹腔麻醉下去掉正畸不銹鋼結(jié)扎絲。第2天開始牙周炎用藥

3、組灌胃補腎活血固齒方4周，牙周炎組與對照組每天灌胃同等劑量的生理鹽水4周；4周后，3組大鼠切取上頜骨第一磨牙牙體牙周組織，4%中性甲醛液固定、10%EDTA脫鈣、石蠟包埋、制作組織切片。HE染色觀察牙周組織病理形態(tài)學改變，免疫組化染色觀察 OPG和RANKL的平均光密度值的改變，數(shù)據(jù)采用 SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析處理。
　　結(jié)果：
　　1.造模4周后，牙周炎組與牙周炎用藥組大鼠造模牙牙體周組織肉眼觀察：牙齦紅腫，質(zhì)地

4、松軟，觸之易出血；HE染色切片顯示，牙齦上皮內(nèi)炎癥細胞增多，毛細血管擴張，牙齦結(jié)合上皮向根方移位，形成牙周袋，破骨細胞增多，牙槽骨有吸收。對照組肉眼觀察：牙齦無明顯炎癥，觸之不易出血；HE染色切片顯示，牙周組織結(jié)構(gòu)比較完整，牙齦組織無明顯炎癥細胞浸潤，結(jié)合上皮無根方移位，破骨細胞少見，無牙槽骨吸收；
　　2.HE染色觀察各組大鼠牙周組織病理形態(tài)學改變。對照組：牙周組織結(jié)構(gòu)比較完整，牙齦組織無明顯炎癥細胞浸潤，結(jié)合上皮無根方移位，破

5、骨細胞少見，無牙槽骨吸收。牙周炎組：牙齦上皮內(nèi)炎癥細胞增多，毛細血管擴張，牙齦結(jié)合上皮向根方移位，形成牙周袋，破骨細胞增多，牙槽骨有吸收。牙周炎用藥組：炎癥細胞浸潤減少，牙齦結(jié)合上皮部分恢復，牙周袋變淺，牙槽骨邊緣破骨細胞數(shù)減少，有成骨細胞產(chǎn)生；
　　3.切片免疫組織化學染色測定RANKL平均光密度值，牙周炎組RANKL平均光密度值高于對照組和牙周炎用藥組，有統(tǒng)計學差異，對照組與牙周炎用藥組無統(tǒng)計學差異；4切片免疫組織化學染色測定