GPX2在肺癌A549細胞中通過調控ROS調節(jié)TGF-β誘導的上皮間質化.pdf

1、目的:檢測在肺癌A549細胞中抑制GPX2的基因表達對TGF-β誘導的EMT和侵襲轉移的影響，并對其機制進行研究。
　　方法:以肺癌A549細胞為研究對象，將細胞分為對照組和TGF-β處理組，用Real-time定量PCR和Western blot技術檢測對照組與TGF-β處理組細胞EMT各項指標的變化和GPX2基因的表達水平；顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)。采用小分子RNA干擾技術干擾GPX2基因表達，運用Real-time定量PCR

2、技術和Western blot技術檢測分別比較各組細胞EMT相關指標的表達情況。transwell和劃痕實驗檢測各組細胞的侵襲和轉移能力；流式細胞儀檢測細胞內ROS產生情況。免疫組織化學技術檢測組織標本中GPX2的表達情況。
　　結果:經TGF-β處理后的A549細胞與對照組比較，細胞內產生ROS的量增加，細胞形態(tài)發(fā)生明顯的間質改變，遷移及侵襲能力明顯增強；在mRNA水平及蛋白水平，TGF-β處理組的A549細胞內E-cadher

3、in的表達量明顯下調，同時該組細胞的N-cadherin及Vimentin表達均明顯增高。TGF-β處理組的A549細胞GPX2基因表達在mRNA及蛋白水平均較對照組明顯下調。在肺癌組織標本中GPX2高表達。在A549細胞中用shRNA沉默GPX2基因后，細胞內ROS產生增加；在mRNA及蛋白水平，E-cadherin的表達水平降低，Vimentin的表達升高，A549細胞的遷移及侵襲能力明顯增強，p-Erk1/2被激活。
　　結