壇紫菜多糖的降解及其產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的初步表征和抗氧化活性研究.pdf

1、壇紫菜是常見(jiàn)的海洋紅藻資源，主要分布于浙江、福建等沿海地區(qū)。壇紫菜硫酸化多糖是其重要活性成分之一，具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。目前對(duì)于壇紫菜硫酸化多糖的研究主要集中于提取條件的優(yōu)化、理化性質(zhì)的測(cè)定以及活性的初步研究，而對(duì)其降解、結(jié)構(gòu)以及構(gòu)效關(guān)系的研究還不深入?；诖耍狙芯恳詨喜藶樵?，采用水提醇沉法提取紫菜粗多糖(Porphyra polysaccharide，PP)，并對(duì)PP的分離純化、理化性質(zhì)、降解、體外抗氧化活性以及

2、結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，期望為進(jìn)一步闡述壇紫菜硫酸化多糖的構(gòu)效關(guān)系奠定理論基礎(chǔ)，也為壇紫菜的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。本研究的主要結(jié)果如下:
　　(1)壇紫菜硫酸化多糖的分離純化及理化性質(zhì)的測(cè)定
　　本研究以壇紫菜為原料，采用熱水提取-醇沉-除蛋白-透析凍干的工藝流程提取粗多糖PP。PP經(jīng)DEAE-纖維素柱色譜分離后得到五個(gè)多糖組分PP1、PP2、PP3、PP4和PP5，測(cè)定并比較PP1～PP5的理化性質(zhì)，結(jié)果顯示:PP1～PP5的分子量

3、均大于500kDa，PP2和PP3的總糖含量(分別為PP2:84.24％，PP3:75.60％)明顯高于其他組分的總糖含量，PP4的蛋白含量最高(9.01％)，PP1～PP5的單糖組成主要為半乳糖和3，6-內(nèi)醚-半乳糖，另外PP2～PP4的單糖組成還包括6-O-甲基-半乳糖，PP5還包括甘露糖和葡萄糖。PP3的硫酸基含量(20.10％)明顯高于其他組分的硫酸基含量。由于硫酸基含量與多糖的活性密切相關(guān)，因此本研究選用PP3作為后續(xù)研究組分

4、。
　　(2)PP3的降解及其產(chǎn)物體外抗氧化活性的研究
　　采用過(guò)氧化氫-抗壞血酸體系降解PP3，并對(duì)其中的四個(gè)降解組分PP3-1～PP3-4(分子量分別為102kDa、72kDa、39kDa、20kDa)的糖含量、硫酸基含量以及體外抗氧化活性進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PP3-1～PP3-4的糖含量分別為78.0％、75.5％、75.1％和75.0％;硫酸基含量分別為18.9％、18.0％、17.2％和19.8％。在抗氧化能力測(cè)定中

5、，PP3及其四個(gè)降解產(chǎn)物(PP3-1～PP3-4)對(duì)超氧陰離子的清除能力由強(qiáng)到弱依次為PP3-4＞(PP3-3/PP3-2/PP3-1)＞PP3;對(duì)羥基自由基的清除能力由強(qiáng)到弱依次為PP3-4＞PP3-3＞PP3-2＞PP3-1＞PP3;還原能力由強(qiáng)到弱依次為PP3-4＞PP3-3＞PP3-2＞PP3-1＞PP3;對(duì)DPPH自由基的清除能力由強(qiáng)到弱依次為PP3-4＞PP3-2＞PP3-3＞PP3-1＞PP3。
　　(3)PP3-4

6、的純化及其產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的初步表征
　　PP3-4經(jīng)Sephadex G-100純化后得到的均一組分得率為91％。采用HPGPC法測(cè)得PP3-4的分子量為20kDa。3，6-內(nèi)醚-半乳糖含量和半乳糖含量分別為6.0％和69.0％(摩爾比為1∶10)。利用GC、GC-MS技術(shù)結(jié)合3，6-內(nèi)醚-半乳糖與半乳糖含量的測(cè)定結(jié)果分析PP3-4的單糖組成，結(jié)果顯示PP3-4是由半乳糖、6-O-Me-半乳糖、3，6-內(nèi)醚-半乳糖組成。利用FT-IR和