miR-29a在冠心病慢性心力衰竭患者外周血內的表達和意義.pdf

1、研究背景與目的：
　　心力衰竭(heart failure, HF)是一種由各類心臟病導致心功能不全的臨床綜合征，是最嚴重的心臟病。近期由于人口老齡化的加重以及高血壓等疾病的流行，心力衰竭的患病率也隨之升高，成為目前最重要的心血管疾病。而心力衰竭最常見的病因是冠心病和高血壓，在我國，冠心病導致的心力衰竭由1980年的36.8％上升至2000年的45.6%,在各種病因中居于首位。
　　MicroRNAs（miRNAs）是內源性

2、高度保守的單鏈非編碼小RNA，長度約為22個核苷酸，miRNAs的作用機制是通過打靶其靶基因的3'非翻譯區(qū)（UTR）調控靶基因的表達。近年來的研究表明，miRNAs參與多種心血管疾病的調控，并且可以穩(wěn)定存在于循環(huán)血液中，因此，miRNAs有作為診斷心血管疾病的生物標志物的潛能。PPARδ/β是氧化物酶體增殖物激活受體（PPARs）的亞型之一，研究表明，PPARδ能夠調節(jié)心肌能量代謝，還參與炎癥、細胞增生和血管重塑等，這些都是引發(fā)心血管疾

3、病的重要因素，通過生物信息學軟件預測，發(fā)現(xiàn)miR-29a有可能打靶 PPARδ并調控其表達。由此我們猜想，與健康人相比，在冠心病慢性心力衰竭患者外周循環(huán)血內，miR-29a表達是否出現(xiàn)異常，如果出現(xiàn)異常，又能否作為新的診斷冠心病慢性心力衰竭的生物標志物呢？
　　實驗方法：
　?。?）選擇冠心病慢性心力衰竭患者和健康對照個體各30例，清晨抽取空
　　腹肘靜脈血5ml，EDTA-2K抗凝，用1.5mlEP管進行分裝，每管2

4、00ul，分裝后置于-80℃保存。
　　（2）通過生物信息學軟件確定課題研究的 miRNA為 miR-29a，并針對miR-29a設計莖環(huán)反轉錄引物和Q-PCR引物。
　?。?）用TRIzol LS分別提取冠心病慢性心力衰竭患者和健康對照個體血液樣本的總RNA，進行反轉錄和Q-PCR。
　　（4）用統(tǒng)計分析學軟件SPSS17.0對冠心病慢性心力衰竭患者和健康對照個體的Q-PCR結果進行統(tǒng)計分析。
　　結果：

5、>　?。?）通過生物信息學軟件預測出PPARδ可能是miR-29a的靶基因。
　　（2）通過t檢驗，結果顯示健康對照組與病例組外周血內miR-29a的水平差異具有統(tǒng)計學差異。
　?。?）通過單因素方差分析，結果顯示健康對照組與各級病例組外周血內miR-29a的水平差異具有統(tǒng)計學差異。
　　（4）通過t檢驗和 X2檢驗，結果顯示健康對照組和 NYHA各級病例組各組間性別、年齡差異不具有統(tǒng)計學差異。
　?。?）通過多

6、元logistic回歸分析，結果顯示對照組和分級病例組各組內不同年齡、性別患者外周血內miR-29a的表達差異不具有統(tǒng)計學意義。
　　（6）通過相關性分析，結果顯示各組外周血內miR-29a水平與NT-proBNP水平顯著正相關。
　　結論：
　　與健康對照組相比，在冠心病慢性心力衰竭患者外周循環(huán)血內 miR-29a表達上升；心衰等級越高，表達上升的倍數(shù)越高；外周循環(huán)血內 miR-29a的水平與年齡、性別無關，與心衰等