miR-19a及DLC1在胃腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：胃癌是最常見的惡性腫瘤之一。從全世界范圍看，胃癌的發(fā)病率已經(jīng)占位居第四位，并在腫瘤相關(guān)的死亡中位列第二。隨著醫(yī)療科技水平的不斷進(jìn)步及人們生活方式、飲食習(xí)慣的改變，我國胃癌的發(fā)病率仍呈現(xiàn)居高不下的趨勢，并且發(fā)病年齡趨向年輕化。胃癌發(fā)病率高、早期診斷困難、中晚期預(yù)后較差，因而尋找新型胃癌敏感的分子標(biāo)志物迫在眉睫，期望這種標(biāo)志物不僅能夠用于胃癌早期診斷，而且還可以為治療及評價(jià)預(yù)后提供可靠依據(jù)。近年來 miRNAs成為眾多學(xué)者研究的熱點(diǎn)。

2、大量研究表明，微小 RNA（microRNAs，miRNAs）是一類長19-25個核苷酸的小片段內(nèi)源性非編碼單鏈RNA，通過與其靶mRNA的3’非轉(zhuǎn)錄區(qū)（3’untranslated region，3’UTR）堿基互補(bǔ)配對，并在轉(zhuǎn)錄后水平通過降解靶mRNA或抑制其翻譯而發(fā)揮調(diào)控基因表達(dá)作用，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等基本活動。其中 miR-19a被報(bào)道在卵巢癌、肺癌、結(jié)直腸癌、膀胱癌等多種惡性腫瘤中高表達(dá)，發(fā)揮著癌基因的作用，與腫

3、瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及侵襲等過程密切相關(guān)。而肝癌缺失因子1（Deleted In Liver Cancer1，DLC1）以在多種惡性腫瘤中發(fā)揮抑癌基因的作用而聞名。大量研究表明DLC1基因的表達(dá)下降或者缺失可能是通過基因雜合丟失或者DNA異常甲基化，參與癌細(xì)胞浸潤、侵襲等生物學(xué)過程。生物信息學(xué)分析表明DLC1是 miR-19a的預(yù)測靶基因。但兩者在胃癌中的研究甚少。因胃癌以腺癌為常見病理組織類型，因此本實(shí)驗(yàn)選用胃腺癌為研究標(biāo)本。通過采用

4、實(shí)時(shí)熒光定量PCR與免疫組織化學(xué)方法，分別分析miR-19a和DLC1在胃腺癌中表達(dá)的差異，為進(jìn)一步闡明胃腺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制提供新的思路，并期望為臨床工作中胃腺癌的早期診斷、基因治療及耐藥研究等提供新分子標(biāo)志物。
　　方法：選用鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2014年4月至2014年9月期間外科手術(shù)并經(jīng)病理證實(shí)為胃腺癌組織標(biāo)本61例及相應(yīng)的正常組織各61例。所有患者術(shù)前均未行放療或者化療。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測miR1-19a在胃

5、腺癌中組織表達(dá)情況，應(yīng)用免疫組化方法檢測 DLC1在胃腺癌中組織的表達(dá)水平，并分別分析兩者的表達(dá)水平與胃腺癌臨床病理因素的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。
　　結(jié)果：⑴miR-19a在胃腺癌組織中的表達(dá)水平明顯高于正常組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。miR-19a的表達(dá)水平與腫瘤的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床因素有明顯相關(guān)性，與年齡、性別的無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。同時(shí)miR-19a中曲線下面積0.951，靈敏度87

6、.3％，特異度92.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示 miR-19a對胃腺癌的診斷有一定的價(jià)值。⑵DLC1在61例胃腺癌組織中的高表達(dá)率為34.43%，在61例正常組織中的高表達(dá)率為70.49%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。DLC1的表達(dá)水平與性別、年齡無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；在中、低分化組表達(dá)水平低于高分化組；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組；在TNM分期III期、IV期的表達(dá)水平低于I期、II期

7、，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。⑶胃腺癌組織中miR-19a與預(yù)測靶基因DLC1表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.398，P＜0.05）。
　　結(jié)論：①miR-19a在胃腺癌組織中高表達(dá)，起著癌基因作用。并與患者分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)，與患者性別、年齡無關(guān)。②miR-19a在胃腺癌表達(dá)中ROC曲線下面積0.951，其靈敏度及特異度較高，提示miR-19a可能對胃腺癌的早期診斷有一定的價(jià)值。③DLC1在胃腺癌組織中低表