BMSCs靜脈移植治療dMCAO大鼠的療效及早期作用機制.pdf

1、黃敏B M S C s 靜脈移植治療d M C A 0 大鼠的療效及早期作用機制中文摘要目的：探討同種異體骨髓間充質干細胞( B o n e m a r r o w m e s e n c h y m a ls t e mc e l l s ，B M S C s )靜脈移植治療大腦中動脈遠端阻塞( D i s t a lm i d d l e c e r e b r a l a r t e r yo c c l u s i o n ，d

2、 M C A O ) 大鼠腦缺血模型的療效及早期作用機制。方法：9 0 只S P F 級S D 雄性大鼠隨機分為假手術組、缺血對照組和B M S C s 靜脈移植組，每組3 0 只。采用d M C A O 制各大鼠腦梗死模型，造模后l h 經尾靜脈移植同種異體大鼠B M S C s 。移植后4 8 h 進行T T C 染色測定大鼠腦梗死體積，用E L I S A 檢測梗死灶周邊皮層區(qū)I G F 一1 ，b F G F 水平，采用免疫組織

3、化學法染色并計數梗死灶周邊皮層區(qū)C D 6 8 、l b a - I染色陽性的小膠質細胞數；并分別于第l d 、3 d 、5 d 和7 d 通過圓柱容器試驗、爬格試驗和平衡木試驗對缺血對照組和B M S C s 靜脈移植大鼠組進行行為學評價。用E L I S A 檢測2 d 、4 d 和7 d 外周血及梗死灶核心區(qū)炎癥因子( I L - 4 、I L - 6 、I L - 1 0 、I L - 1 1 3 和T N F —a ) 含量。

4、結果：大鼠腦梗死4 8 h 后，B M S C s 靜脈移植組的梗死體積較對照組顯著減小( P0 ．0 5 ) ；外周血中的炎癥因子含量檢測結果示： ( 1 ) 在B M S C s移植后第2 d ，移植組的I L 一6 含量較對照組顯著升高( P < 0 ．0 5 ) ，I L ．4 和I L ．1 p 有下降趨勢，T N F ．a 有升高趨勢，但無統(tǒng)計學差異，I L ．1 0 較對照組無明顯變化。( 2 ) 在B M S C

5、s移植后第4 d ，移植組的I L 一6 含量較對照組明顯升高( P < 0 ．0 5 ) ，T N F 一儀和I L ．1 8 含量亦黃敏B M S C s 靜脈移植治療d M C A O 大鼠的療效及早期作用機制 3A b s t r a c tO b j e c t i v e ：T o e x p l o r e t h e c u r a t i v e e f f e c t a n d e a r l y m e c

6、 h a n i s m o f a l l o g e n e i c b o n e m a r r o wm e s e n c h y m a ls t e mc e l l s ( B M S C s ) t r a n s p l a n t i n gi n t r a v e n o u s l y i n r a t sw h i c h u n d e r w e n td i s t a lm i d d l ec

7、 e r e b r a la r t e r yo c c l u s i o n ( d M C A O ) ．M e t h o d s ：A t o t a l o f 9 0S p r a g u e D a w l e y ( S D ) m a l er a t sw e r ed i v i d e di n t os h a mg r o u p ( 3 0c a s e s ) ，c o n t r o lg r o

8、 u p ( 3 0c a s e s ) a n d m a r r o w m e s e n c h y m a ls t e mc e l l s ( B M S C s ) t r a n s p l a n t e dg r o u p ( 3 0c a s e s ) r a n d o m l y ．C e r e b r a l i n f a r c t i o n m o d e l s w e r e m a d

9、 e t h r o u g h o c c l u d i n g d i s t a l m i d d l ec e r e b r a la r t e r y ( d M C A O ) ．O n eh o u rl a t e r - t h eB M S C s W a S t r a n s p l a n t e dt h r o u g h t h e t a i l v e i n ．T h e b r a i n

10、 s l i c e sw e r e T T C s t a i n e da n d m e c e r e b r a li n f a r c t i o nv o l u m e s w e r ec a l c u l a t e d a t4 8ha f t e rd M C A O ．A t t h e1 “，3 一，5 ‘“a n d7 m d a y a f t e rt h e d M C A O ，b e h a

11、 v i o r a l t e s t ss u c ha s c y l i n d e rt e s t ，g r i dw a l k i n g t e s t a n d b e a m b a l a n c e t e s tw e r ep e r f o r m e d ．T h ea m o u n to f m i c r o g l i aw a sc a l c u l a t e di nt h ei m

12、m u n o h i s t o c h e m i c a l l ys t a i n e dp e r i —i s c h e m i ac o r t e xa r e aa t 4 8 h a f t e rt h ed M C A O a n d t h eI G F 一1a n db F G F c o n c e n t r a t i o nw a s d e t e c t e d i nt h e s a l

13、T l e a r e a u s i n gE L I S A ．A t t h e 2 以，4 t h ，a n d 7 t o d a y , t h ei n f l a m m a t o r y c y t o k i n e s ( I L ．4 、I L ．6 、I L - I O 、I L - 1 1 3 a n dT N F - a )i n b r a i n t i s s u ea n d p e r i p

14、h e r a lb l o o d w e r ed e t e c t e d u s i n g E L I S A ．R e s u l t s ：T h e c e r e b r a l i n f a r c t i o nv o l u m e s w e r es i g n i f i c a n t l ys m a l l e r i nB M S C s g r o u p t h a nt h o s e i

15、 nc o n t r o lg r o u p ( P < 0 ．0 5 ) ．A t t h ee a r l y s t a g eo f d M C A O ，t h e b e h a v i o r s o f B M S C s g r o u p w a ss i g n i f i c a n t l ys u p e r i o rt o t h o s eo f c o n t r o lg r o u pi

16、 n c y l i n d e r t e s t ( t h e 1 “．3 謝a n d5 2 “d a ya f t e rd M C A O ) a n d g r i dw a l k i n gt e s t ( t h e1 3 ‘a n d3 珂d a ya f t e rd M C A O ) ( P < 0 ．0 5 ) ，w h i l e ，t h et w og r o u p ss h o w e d

17、 n os t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ea t7 ' h d a ya f t e rd M C A O ．N o s t a f i s t i c a ld i f f e r e n c ew a sd e t e c t e d b e t w e e n t h et w o g r o u p si nb e a m b a l a n c e t e s t ．I n