高表達(dá)miR-133的大鼠BMSCs治療心肌梗死的療效分析.pdf

1、目的：通過構(gòu)建攜帶microRNA-133(miR-133)的慢病毒質(zhì)粒感染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs），使得miR-133在BMSCs中高表達(dá)，觀察其移植入大鼠心梗區(qū)域后對心肌梗死的治療作用，并對其作用機(jī)制作初步研究。
　　方法：在分離、培養(yǎng)SD大鼠BMSCs方面我們采用的是骨髓差異貼壁法，然后對其進(jìn)行擴(kuò)增和鑒定；使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染 miR-133-agomir（過表達(dá)）或 miR-133 antagomir（抑制）以調(diào)

2、控miR-133在BMSCs內(nèi)的表達(dá)水平，之后收集BMSCs并觀察miR-133對BMSCs的活力、凋亡的影響，再與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)觀察心肌細(xì)胞中Snail1基因的表達(dá)變化。構(gòu)建攜帶綠色熒光蛋白（GFP）的miR-133慢病毒載體并感染BMSCs，建立miR-133高表達(dá)的BMSCs。然后采用冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎法建立大鼠心梗模型后，通過心肌內(nèi)注射方法，分別將 BMSCs-pCDH-miR-133組,BMSCs-pCDH-vecto組，正

3、常培養(yǎng)的BMSCs組及PBS組移植至心梗周邊區(qū)域，并在術(shù)后第7天及第28天分別檢測大鼠心梗后心功能變化，28天后取出心臟測算心梗面積評估治療效果。
　　結(jié)果：miR-133-agomir轉(zhuǎn)染后的BMSCs組中細(xì)胞凋亡的數(shù)量明顯減少，在與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中此組也顯著降低了Snail1基因的表達(dá)；我們成功構(gòu)建miR-133的慢病毒質(zhì)粒并高效轉(zhuǎn)染BMSCs,發(fā)現(xiàn)BMSCs-miR-133移植組可以通過減少心梗后心臟的炎癥侵潤，減少梗死

4、區(qū)域面積來起到緩解心肌梗死的作用，對心功能的恢復(fù)起到促進(jìn)效果。
　　結(jié)論：綜上所述，miR-133高表達(dá)可以減少BMSCs的凋亡；本研究成功構(gòu)建高表達(dá)miR-133的BMSCs；BMSCs-miR133可以顯著改善心梗后心臟功能，減少心臟梗死區(qū)域面積，這可能與BMSCs凋亡減少以及miR-133抑制了心肌細(xì)胞(CMs)中Snail1基因的表達(dá)有關(guān)。本研究將為以后進(jìn)一步利用基因修飾的BMSCs且使其更加適用于相關(guān)疾病的治療提供了理論