Wistar大鼠心肌梗死后SDF-1-CXCR4的表達.pdf

1、目的：掌握建立Wistar大鼠的心肌梗死模型，檢測基質細胞來源因子-1(SDF-1)和其受體CXCR4在心肌梗死后不同時間(0.5h，7d，14d，28d)不同部位(心肌梗死區(qū)，梗死邊緣區(qū)，正常區(qū))的表達，以及用免疫組化法檢測不同心肌組織區(qū)域不同時間Ⅷ因子的表達，研究SDF-1/CXCR4軸在心肌梗死后血管新生中的作用，為進一步的工作進行基礎研究。 方法：1、動物造模：結扎20只8周齡雄性Wistar大鼠的左冠狀動脈前降支，建立

2、了心肌梗死模型。2．大鼠心梗造模術后，分別于0.5h,7d，14d,28d處死，取心肌正常區(qū)、梗死邊緣區(qū)、梗死區(qū)的組織，用免疫組化法檢測不同心肌組織區(qū)域不同時間Ⅷ因子的表達，將切片用KS400 3.0圖像分析軟件進行陽性面積(Area)檢測。3．提取心肌組織的總RNA和總蛋白。分別用RT-PCR和Western印跡檢測心肌組織不同組織區(qū)域在不同時間SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白水平的表達變化情況。4．試驗數據以均數士標準差(灶s

3、)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析數據，兩個均數間的比較采用t檢驗。 結果：Wistar大鼠心肌梗死造模后，和假手術組比較，心梗造模組的大鼠心肌組織中血管新生明顯，其中Ⅷ因子的表達在術后7天到14天間顯著增高(P<0.01)。同時SDF-1的mRNA和蛋白的表達明顯增高(P<0.01)，一直持續(xù)到14天以后，在不同心肌部位的表達有明顯的差異；CXCR4的mRNA和蛋白表達亦有明顯的增高(p<0.01)．CXCR4的表達高峰