心肌梗死后心衰大鼠炎癥損傷機制及干預(yù)的研究.pdf

1、背景：隨著國民生活方式的改變、人口老齡化及城鎮(zhèn)化進(jìn)程的加速，中國心血管病患病率處于持續(xù)上升階段，心力衰竭患病人群也逐年上升。已有研究證實，心力衰竭是由包括炎癥反應(yīng)在內(nèi)的一系列復(fù)雜的病理生理機制導(dǎo)致的一組臨床綜合征，炎癥反應(yīng)的持續(xù)存在導(dǎo)致了心肌細(xì)胞的損傷。目前觀察到凋亡和自噬均可出現(xiàn)在心衰心肌細(xì)胞中，但自噬對心臟是保護(hù)作用還是損害作用仍未有定論。臨床上觀察到曲美他嗪、瑞舒伐他汀能降低炎癥因子水平并改善心衰患者心功能，但其在心衰中的應(yīng)用證據(jù)

2、不足，其對心肌細(xì)胞凋亡和自噬的影響的研究目前還較少。
　　目的：研究心肌梗死后心衰大鼠炎癥因子、心功能及心肌細(xì)胞凋亡和自噬的水平，以及給予LPS刺激后單獨應(yīng)用曲美他嗪或瑞舒伐他汀后對上述指標(biāo)的影響；探討心肌細(xì)胞自噬對心臟的作用及心梗后心衰大鼠中炎癥因子對凋亡和自噬水平的影響。
　　方法：本實驗通過結(jié)扎成年雄性 Wistar大鼠前降支并飼養(yǎng)四周來制備心梗后心力衰竭模型40只，另設(shè)①假手術(shù)組（sham組）10只（未結(jié)扎前降支，余

3、步驟相同）。制備成功的心力衰竭大鼠模型40只，隨機選取30只給予腹腔注射 LPS（脂多糖）刺激一次，另外10只作為②模型組（model組）。給予LPS刺激的大鼠根據(jù)是否給予藥物再隨機分為③未給藥組（model+LPS組）、④曲美他嗪組（QMTQ組）、⑤瑞舒伐他汀組（RSFTT組）。給藥4周后，通過心臟超聲及血流動力學(xué)評價心功能；通過ELISA法測定血清中NT-proBNP、hs-TnT、IL-6、hs-CRP、TNF-α的水平；左心室取

4、材后進(jìn)行HE染色、Masson染色、TUNEL及DAPI染色，以觀察心肌病理學(xué)改變、心肌纖維化及凋亡情況；左心室梗死邊緣區(qū)取材，通過Western-Blot檢測自噬相關(guān)蛋白LC3B、P62的表達(dá)，通過RTQ-PCR檢測自噬相關(guān)基因Beclin1、Atg5、Atg7、Atg14的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.各組大鼠實驗結(jié)束后均存活；模型組大鼠體重下降（P<0.05），其余各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；反應(yīng)心室重構(gòu)的心臟

5、指數(shù)及心衰嚴(yán)重程度的肺指數(shù)，模型組有升高的趨勢，兩用藥組有下降的趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.通過 ELISA法測定血清中 IL-6、hs-CRP、TNF-α、NT-proBNP、hs-TnT的水平：與假手術(shù)組相比，模型組炎癥因子及 NT-proBNP、hs-TnT水平明顯升高（P<0.01）；model+LPS組與模型組相比無變化；兩用藥組與model+LPS組相比，炎癥因子及NT-proBNP、hs-TnT水平降低（P<

6、0.05或P<0.01）。
　　3.由心臟超聲及血流動力學(xué)反應(yīng)的心功能表明：與假手術(shù)組相比，模型組心功能明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；model+LPS組與模型組相比無變化；兩用藥組與model+LPS組相比，心功能明顯改善，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4.HE染色及Masson染色：模型組心肌細(xì)胞排列紊亂、心肌細(xì)胞腫脹、心肌間及血管旁可見大量膠原蛋白沉積；model+LPS組與模型組相比無變化；兩用藥組與 model+LPS組相

7、比，心肌細(xì)胞紊亂及細(xì)胞腫脹改善，細(xì)胞內(nèi)及血管旁膠原蛋白沉積減少。
　　5.TUNEL及DAPI染色結(jié)果表明：模型組大鼠凋亡水平有上調(diào)趨勢；model+LPS組與模型組相比凋亡水平無變化；兩用藥組與 model+LPS組相比凋亡水平有下降趨勢。
　　6.Western-Blot和RTQ-PCR結(jié)果表明：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠自噬體合成減少，自噬體分解減少，自噬水平下降（P<0.05）；model+LPS組與模型組相比自噬水

8、平無變化；兩用藥組與 model+LPS組相比，自噬體合成增加，自噬流通暢，自噬水平上調(diào)（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.心梗后心衰大鼠由于炎癥反應(yīng)所致的心肌損傷使得心力衰竭加重，其機制可能與炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡增加和自噬減少有關(guān)。
　　2.曲美他嗪、瑞舒伐他汀通過抑制炎癥反應(yīng)，間接調(diào)控了心肌細(xì)胞凋亡和自噬水平，使得凋亡減少、自噬增加，在保護(hù)心肌細(xì)胞的基礎(chǔ)上起到延緩心肌梗死后心力衰竭進(jìn)展的作用。